虎纹莺哥茎段(侧芽)的组织培养方法有哪些要点?
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发布时间：2024-10-18 21:32
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①无菌材料获得。取虎纹凤梨花已凋谢1～2个月的植株，切掉根部，逐层剥掉基部叶片，可看到叶腋间的侧芽。小心地沿短缩茎向上剥掉所有叶片，最后切掉顶部的叶片，保留1～2mm的叶基或直接切掉茎尖。用0.1%HgCl2水溶液振荡消毒10min（加2滴吐温），无菌水冲洗5～6次后，再用无菌纸吸干水分，在超净台上吹干。
取消毒好的外植体，用力切去被HgCl2水溶液接触到的伤口部分，将剩余部分纵切2块，小切块基部向下竖直接种到培养基。每块外植体都有1～2侧芽，主要诱导侧芽萌发形成丛生芽。
②不定芽诱导。不定芽诱导培养基：MS＋6-BA3.0～5.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间10～12h/d，光照度20～30μmol/（m2穝）。
20d后，接种外植体变绿，短缩茎上的侧芽逐渐萌发。将萌发的侧芽分离，在相同的培养基中培养40d左右，可形成丛生芽。
③不定芽增殖。不定芽增殖培养基：MS＋6-BA2.0～3.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间10～12h/d，光照度30～40μmol/（m2穝）。
将丛生芽切分成小块，接种到继代培养基上，光照培养，每隔30～40d继代1次，增殖系数在3.0以上。
④壮苗培养。壮苗培养基：MS＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间12～15h/d，光照度30～40μmol/（m2穝）。
把产生的丛生不定芽分成单株或切割成小块后接种于培养基中。每瓶接种10株或丛生芽4块。
⑤生根培养。生根培养基：MS＋NAA0.2mg/L＋蔗糖30g/L＋卡拉胶5.8g/L，pH5.8～6.0。培养温度25～29℃，光照时间15～20h/d，光照强度40μmol/（m2穝）。
当继代增殖的丛生芽长高到3～4cm时，将丛生芽分成单株，接种到生根培养基上，每瓶10株。光照培养25d后，生根率达100%。生根苗叶片浓绿，植株粗壮，可置于荫棚（70%～80%遮阴度）内炼苗，5～7d后可进行移栽。
⑥移栽。移栽时，用清水将黏附在根上的培养基洗净，用0.2%～0.3%多菌灵水溶液浸泡10～15min，移栽到基质中，淋水定根。基质宜选疏松肥沃的表土并配以过筛的河沙及椰糠、泥炭为宜，并用土壤消毒剂消毒。移栽密度为每平方米100～120株。移栽后遮阴保湿10～15d，然后逐渐去掉保湿遮阴物。移栽成活率99%以上。
虎纹凤梨不定芽增殖及移栽
A.不定芽增殖B.移栽苗。
