质粒DNA纯化中的SDS为什么要加入?
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发布时间：2024-10-23 21:36
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时间：2024-10-27 00:33
原因：当改变的DNA和蛋白质加入溶液II，细菌溶解，蛋白质和DNA变性和溶解。这使得整个溶液非常粘稠，拉出了丝。
将溶液添加到基础处理中。NaOH主要用于裂解细胞和释放DNA，因为在强碱性条件下，膜由双层膜结构转变为微胶囊结构。SDS与NaOH配合使用，增强NaOH的强碱性，SDS作为阴离子表面活性剂，破坏脂质双层膜。
这一步的注意事项：
首先，不要太久，因为基因组DNA片段在这样的碱性条件下会慢慢分解。
第二，加入溶液2后，操作一定要轻柔，剧烈混合会导致基因组DNA污染。
扩展资料：
注意事项：
1、 洗脱缓冲液在60℃洗脱时，洗脱缓冲液或去离子水效果更好。
2、 细菌应该完全悬浮。如果菌体没有完全悬浮，加入溶液II后，剩余菌体将成为难以完全分解的菌体。加入溶液III后，仍有一部分蛋白质残留在溶液中，成为蛋白质残渣的最大来源。
3、测量DNA溶液体积，按lg/ mL准确加入固体CsCl，加热至30℃溶解。轻轻地混合溶液直到盐溶解。
参考资料：百度百科-质粒抽提
参考资料：百度百科-质粒DNA纯化
