三天两检至少需要大于等于24小时才能做第二次，超过24小时是可以做的。
三天两检的意思就是居民需要在三天内完成两次核酸检测，并且两次核酸检测的时间间隔在24小时以上，通常两次核酸检测的时间间隔是根据核酸采样的时间计算的，很少按照出结果的时间计算。