一、实验原理
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定，需要在显微镜下，借助于特殊工具—测微尺，包括目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺适用于校正目镜测微尺每个的相对长度。然后，根据微生物细胞相当于目镜测微尺的个数，即可计算出细胞的实际大小。
实验程序Ⅰ（测定微生物的大小）
测定的工具：目镜测微尺镜台测微尺
实验程序Ⅱ（测定微生物的大小）
目镜测微尺的校正：在高倍镜下，看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度重合，然后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜台测微尺的刻度每格长10μm，所以可得：
目镜测微尺每格长度（μm）=（镜台测微尺格数×10）/目镜测微尺格数
注意：校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的接物镜、接目镜、镜筒长度等）进行，而且只能在这特定的情况下才可重复使用。
菌体大小的测定：取下镜台测微尺，将细菌染色标本置于载物台上，然后在油镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽。
操作步骤
1、装目镜测微尺
2、校正目镜测微尺
3、菌丝体大小测定：将观察的黄曲霉菌丝体直接进行菌丝体大小的测定
4、测定完毕后，取出目镜测微尺用擦净纸擦干净，放回盒内保存。
第三节微生物的显微计数
血球计数板通常是一块特制的厚载玻片，载玻片上有四条槽而构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽而隔成两半，每个半边上面各刻有一个方格网。
每个方格网共分九大格，其中间的一大格又称为计数室，微生物的计数就在此大格中进行。
常用的血球计数板的计数室有两种规格的刻度网格。
一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，即为16×25。
另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，即25×16。
但是不管计数室是那种规格，其计数室的小格数总是相同的，即16×25＝25×l6＝400（小格）计算
每一个大方格边长为1mm，则每一大方格面积为1mm2。盖上盖玻片后，载玻片计数室与盖玻片之间的高度为0、1mm，所以每个计数室（大方格）的体积为0、1mm3。
在计数时，通常数五个中方格的总菌数，求得平均值。再乘上16或25就得一大方格中的总菌数。然后再换算成1毫升菌液中的总菌数。
（1ml＝1cm3＝1，000mm3）
实验材料
酵母菌悬液
显微镜，血球计数板。
盖玻片，无菌滴管，吸水纸，擦镜纸，香柏油、镜头洗液。
1、取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖血盖片。
2、取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。
3、用10×镜观察并将计数室移至视野中央。
4、在10×镜下计数：计数4个（或5个）中格的平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上16（或25）就得出计数区总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌数。
5、注意事项：计上不计下，计左不计右。出芽计一半
实验程序计数步骤：
1、取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖玻片。
2、取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴（不宜过多），使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。
3、静置5分钟后，将血球计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数板的大方格网位置。寻找时光圈要缩小，光线要偏暗些，并将计数室移至视野中央。
4、在高倍镜下计数：随机地计数五个中格内的菌数，然后求得每个中格的平均值。乘上16（或25）就得出一大格中的总菌数，最后再换算到每毫升菌液中的含菌数量。
由于菌体细胞在血球计数板上处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，故观察时必须不断调节微调节器，方能数到全部菌体，以免遗漏。
5、计算方法：
酵母菌细胞数/毫升=[（X1+X2+X3+X4+X5）/5]*25（或16）×10×1000×稀释倍数
6、注意事项。
计数时，为避免重复或遗漏计数，凡是遇到压在方格线上的菌体，一般以压在底线和右侧线上的菌体计入本格内，遇到有芽体的酵母时，如果芽体和母体同等大时，就按两个酵母菌体计数。
7、计数完毕后，血球计数板要立即清洗干净，并用吸水纸吸干，最后用擦镜纸擦干净并放回盒。
将显微计数结果记录于下表中。T表示五个中方格中的总菌数；D表示菌液稀释倍数。