采用表型和分子标记聚类研究杂交籼稻亲本的遗传多样性

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采用表型和分子标记聚类研究杂交籼稻亲本的遗传多样性

＊　万建民１，２，＊王胜军１　陆作楣１，

１２（南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室，江苏南京２１００９５；中国农业科学院作物科学研究所，北京１０００８１；＊通讯联系人，

Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｚｘｍ２０００＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ；ｗａｎｊｍ＠ｎｊａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ）

ＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＰａｒｅｎｔａｌＬｉｎｅｓｉｎｉｎｄｉｃａＨｙｂｒｉｄＲｉｃｅＢａｓｅｄｏｎＰｈｅｎｏｔｙｐｉｃＣｈａｒａｃｔｅｒｓａｎｄＳＳＲＣｌｕｓｔｅｒＡｎａｌｙｓｉｓ

１，＊，Ｗ１，２，＊ＷＡｈｅｎｇ－ｊｕｎＬｕｏ－ｍｅｉ１，ｉａｎ－ｍｉｎＮＧＳＵＺＡＮＪ

１２（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＧｅｎｅｔｉｃｓ＆ＧｅｒｍｐｌａｓｍＥｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ，ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｃｈｉｎａ；Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ

ｏｆＣｒｏｐＳｃｉｅｎｃｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ；＊Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒｓ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｚｘｍ２０００＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ；ｗａｎｊｍ＠ｎｊａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｗｏｍｅｔｈｏｄｓｏｆｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓｂａｓｅｄｏｎｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｓａｎｄＳＳＲｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｒｋｅｒｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄｔｏ

ｓｔｕｄｙｔｈｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ４１ｐａｒｅｎｔａｌｌｉｎｅｓｐｏｐｕｌａｒｉｚｅｄｉｎｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｈｙｂｒｉｄｒｉｃｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎＣｈｉｎａ．Ｆｏｒｔｙ－ｏｎｅｅｎｔｒｉｅｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄ－ｅｄｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓ（ｉ．ｅ．ｅａｒｌｙｏｒｍｅｄｉｕｍ－ｍａｔｕｒｉｔｙｇｒｏｕｐ；ｍｅｄｉｕｍｏｒｌａｔｅ－ｍａｔｕｒｉｔｙｇｒｏｕｐ）ａｎｄｆｕｒｔｈｅｒｉｎｔｏｓｉｘｓｕｂｇｒｏｕｐｓｂａｓｅｄｏｎｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅｅａｒｌｙｏｒｍｅｄｉｕｍ－ｍａｔｕｒｉｔｙｇｒｏｕｐｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆ１５ｍａｉｎｔａｉｎｅｒｌｉｎｅｓ，ｆｏｕｒｅａｒｌｙ－ｍａｔｕｒｉｔｙｒｅｓｔｏｒｅｒｌｉｎｅｓａｎｄｔｗｏｔｈｅｒｍｏ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｇｅｎｉｃｍａｌｅｓｔｅｒｉｌｅｌｉｎｅｓ．Ｔｈｅｍｅｄｉｕｍｏｒｌａｔｅ－ｍａｔｕｒｉｔｙｇｒｏｕｐｉｎｃｌｕｄ－ｅｄ１６ｒｅｓｔｏｒｅｒｌｉｎｅｓａｎｄｆｏｕｒｍｅｄｉｕｍｏｒｌａｔｅ－ｍａｔｕｒｉｔｙｍａｉｎｔａｉｎｅｒｌｉｎｅｓ．ＷｈｉｌｅｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆＳＳＲｃｌｕｓｔｅｒａｎａｌｙｓｉｓ，ｔｈｅｅｎｔｒｉｅｓｗｅｒｅｃｌａｓｓｉｆｉｅｄｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓ（ｉ．ｅ．ｍａｉｎｔａｉｎｅｒｌｉｎｅｇｒｏｕｐａｎｄｒｅｓｔｏｒｅｒｌｉｎｅｇｒｏｕｐ）ａｎｄｓｅｖｅｎｓｕｂｇｒｏｕｐｓ．Ｔｈｅｍａｉｎｔａｉｎｅｒｌｉｎｅｇｒｏｕｐｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆａｌｌ１９ｍａｉｎｔａｉｎｅｒｌｉｎｅｓ，ｔｗｏｔｈｅｒｍｏ－ｓｅｎｓｉｔｉｖｅｇｅｎｉｃｍａｌｅｓｔｅｒｉｌｅｌｉｎｅｓ，ａｎｄｔｈｅｒｅｓｔｏｒｅｒｌｉｎｅｇｒｏｕｐｗａｓｃｏｍ－ｐｏｓｅｄｏｆａｌｌ２０ｒｅｓｔｏｒｅｒｌｉｎｅｓ．ＣｌａｓｓｉｆｙｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓｂａｓｅｄｏｎＳＳＲａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｂａｓｉｃａｌｌｙｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｐｅｄｉｇｒｅｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓａｎｄｔｈｅｓｔａｔｕｓｏｆｈｙｂｒｉｄｒｉｃｅｂｒｅｅｄｉｎｇｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔＳＳＲａｎａｌｙｓｉｓｃｏｕｌｄｂｅａｂｅｔｔｅｒｍｅｔｈｏｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｄｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｐａｒｅｎｔａｌｌｉｎｅｓｉｎｉｎｄｉｃａｒｉｃｅ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｙｂｒｉｄｒｉｃｅ；ｐａｒｅｎｔａｌｌｉｎｅｓ；ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒ；ｓｉｍｐｌｅｓｅｑｕｅｎｃｅｒｅｐｅａｔ；ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓ；ｐｅｄｉｇｒｅｅ；ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ摘　要：以４１份杂交籼稻骨干亲本和部分新育成的亲本为试验材料，采用表型性状和ＳＳＲ分子标记２种聚类分析方法对杂交籼稻亲本的类群划分进行了比较研究，表型聚类以１５个表型性状为依据，将供试材料划分为早、中熟和中、晚熟两大类群、６个亚群。早、中熟类群包含１５个保持系、４个早熟恢复系和２个温敏核雄性不育系；中、晚熟类群包括１６个恢复系和４个中、晚熟保持系。利用ＳＳＲ分子标记将供试材料划分为保持系和恢复系两大类群、７个亚群。保持系群包括全部１９个保持系、２个温敏核雄性不育系，恢复系群则包含全部２０个恢复系，分类结果和系谱分析基本吻合。结合杂交籼稻育种实践，判断分子标记可能是研究亲本遗传多样性的一种较好方法。

关键词：杂交水稻；亲本；表型性状；微卫星标记；聚类分析；系谱；遗传多样性

中图分类号：Ｑ９４３；Ｓ５１１．０３２

文献标识码：Ａ

文章编号：１００１－７２１６（２００６）０５－０４７５－０６

　　水稻是大面积利用杂种优势的自花授粉作物，在杂种优势利用中亲本选择是配制强优势组合、有效利用水稻杂种优势的关键环节。因此，全面、系统地了解杂交稻亲本的亲缘关系、遗传多样性，对于减少亲本选配的盲目性，提高杂交育种工作的预见性具有重要意义。育种家常常通过农艺性状和系谱关系来判断亲本间的遗传差异，配组效果虽然有效，但由于受到时空和经验限制，且难以量化，配组效率仍然不高。ＤＮＡ分子标记技术不受基因表达的时空限制和环境条件的影响，在研究亲本之间遗传差异

１］利用和多样性方面得到广泛应用。陈亮等［

２］利用Ｒ度的结论；刘殊等［ＡＰＤ引物对我国杂交稻

的３１个恢复系进行了ＤＮＡ多态性分析，将这３１

３］用１个亲本分成四大类群；李云海等［００个ＲＡＰＤ

引物分析了２４个籼稻雄性不育系，并将它们分为４

４］还利用Ｒ类；姬广海等［ＡＰＤ技术，对５３份抗白叶

枯病水稻品种进行遗传多样性分析。与以上几种分子标记相比，ＳＳＲ分子标记以ＰＣＲ为基础，快速简便、可靠性强、重复性高且多态性丰富，近年来在水稻的遗传多样性研究中得到了广泛应用。段世华

５］利用２等［５对ＳＳＲ引物，分析了生产中广泛应用

的３５个杂交水稻恢复系，认为我国杂交水稻恢复系

收稿日期：２００５－１２－０５；修改稿收到日期：２００６－０２－１３。基金项目：长江学者和创新团队发展计划资助项目。

第一作者简介：王胜军（１９６７－），男，副研究员，博士研究生。

ＡＦＬＰ和ＲＦＬＰ技术对２０个水稻品种（系）进行了遗传多样性分析，得出了ＡＦＬＰ适合于多样性研究，ＲＦＬＰ则更适合于籼粳分类及度量籼粳分化程

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中国水稻科学（ＣｈｉｎｅｓｅＪＲｉｃｅＳｃｉ）　第２０卷第５期（２００６年９月）

资源比较丰富，但其遗传差异较小，遗传背景单一，从而在很大程度上限制了我国水稻杂种优势的利

６］利用１用；邱福林等［５对ＳＳＲ引物对北方杂交粳

稻亲本作为研究材料，对表型及ＳＳＲ分子标记聚类分析划分籼稻种质类群的方法进行比较研究，并分析这些亲本的遗传差异，从而为杂交籼稻的亲本选配提供参考依据。

稻骨干亲本进行了遗传差异鉴定和籼性程度分析，２９个亲本可分成５组，各组间亲本的遗传差异相对

７］还利用形态、较大。余汉勇等［等位酶和ＳＳＲ标记

１　材料与方法

１．１　试验材料

４１份材料包括１９个籼稻保持系、２个温敏核雄性不育系和２０个恢复系，其中多数为生产上推广杂交稻的骨干亲本，其来源见表１。试验材料包括野

研究水稻矮仔占衍生品种的遗传差异，聚类分析表明３种方法在鉴别品种的遗传差异上存在较大差异。为进一步探索适合杂交稻亲本的分类方法，我们以生产上大面积应用的和新育成的４１个杂交籼

表１　供试材料名称及系谱来源Ｔａｂｌｅ１．Ｅｎｔｒｉｅｓａｎｄｔｈｅｉｒｐｅｄｉｇｒｅｅｓ．编号Ｎｏ．１

２３４５６７８９１０１１１２１３１４１５１６１７１８１９２０２１２２２３２４２５２６２７２８２９３０３１３２３３３４３５３６３７３８３９４０４１

材料名称Ｍａｔｅｒｉａｌ　　协青早ＢＸｉｅｑｉｎｇｚａｏＢ

金协Ｂ　ＪｉｎｘｉｅＢ中９Ｂ　Ｚｈｏｎｇ９ＢＹ３３Ｂ

新露Ｂ　ＸｉｎｌｕＢ珍汕９７Ｂ　Ｚｈｅｎｓｈａｎ９７Ｂ冈４６Ｂ　Ｇａｎｇ４６ＢⅡ－３２ＢＤ６２Ｂ

新协黄Ｂ　ＸｉｎｘｉｅｈｕａｎｇＢ丰７Ｂ　Ｆｅｎｇ７Ｂ金２３Ｂ　Ｊｉｎ２３Ｂ丝苗Ｂ　ＳｉｍｉａｏＢ粤丰Ｂ　ＹｕｅｆｅｎｇＢ龙特浦Ｂ　ＬｏｎｇｔｅｐｕＢ博Ｂ　ＢｏＢⅡ协Ｂ　ⅡｘｉｅＢ川７Ｂ　Ｃｈｕａｎ７Ｂ粤泰Ｂ　ＹｕｅｔａｉＢ培矮６４Ｓ　Ｐｅｉ′ａｉ６４Ｓ６３１１Ｓ福恢０１６　Ｆｕｈｕｉ０１６明恢７７　Ｍｉｎｇｈｕｉ７７测６４－７　Ｃｅ６４－７桂９９　Ｇｕｉ９９Ｒ８１８ＩＲ２４Ｕｎｉ２抗８５　Ｋａｎｇ８５Ｒ３５１蜀恢５２７　Ｓｈｕｈｕｉ５２７玉１８　Ｙｕ１８９３０８科恢７５２　Ｋｅｈｕｉ７５２９３１１ＣＤＲ２２明恢８６　Ｍｉｎｇｈｕｉ８６茂三　Ｍａｏｓａｎ双七占　Ｓｈｕａｎｇｑｉｚｈａｎ明恢６３　Ｍｉｎｇｈｕｉ６３盐恢５５９　Ｙａｎｈｕｉ５５９

ｅｄｉｇｒｅｅ系谱Ｐ

军协／温选青／／秋塘早５号　Ｊｕｎｘｉｅ／Ｗｅｎｘｕａｎｑｉｎｇ／／Ｑｉｕｔａｎｇｚａｏ５

金２３Ｂ／协青早Ｂ　Ｊｉｎ２３Ｂ／ＸｉｅｑｉｎｇｚａｏＢ优１Ｂ／Ｌ３０１Ｂ／／内江菲改Ｂ　Ｙｏｕ１Ｂ／Ｌ３０１Ｂ／／ＮｅｉｊｉａｎｇｆｅｉｇａｉＢ嘉浙Ｂ　ＪｉａｚｈｅＢ（测６４－７／利托）／（Ｖ２０Ｂ／２６窄早）（Ｃｅ６４－７／Ｌｉｔｕｏ）／（Ｖ２０Ｂ／２６Ｚｈａｉｚａｏ）珍珠矮１１／汕矮选４号　Ｚｈｅｎｚｈｕ′ａｉ１１／Ｓｈａｎ′ａｉｘｕａｎ４二九矮７号／Ｖ４１Ｂ／／珍汕９７／雅矮早　Ｅｒｊｉｕ′ａｉ７／Ｖ４１Ｂ／／Ｚｈｅｎｓｈａｎ９７／Ｙａ′ａｉｚａｏ珍汕９７Ｂ／ＩＲ６６５　Ｚｈｅｎｓｈａｎ９７Ｂ／ＩＲ６６５红突３１／Ｄ２９７Ｂ　Ｈｏｎｇｔｕ３１／Ｄ２９７Ｂ新露Ｂ／协青早Ｂ　ＸｉｎｌｕＢ／ＸｉｅｑｉｎｇｚａｏＢ不详　Ｕｎｋｎｏｗｎ黄金３号／（菲改Ｂ／Ｍ）Ｆｕａｎｇｊｉｎ３／（ＦｅｉｇａｉＢ／Ｍ）Ｆ５　Ｈ５不详　Ｕｎｋｎｏｗｎ协青早Ｂ／ＩＲ５８０２５Ｂ　ＸｉｅｑｉｎｇｚａｏＢ／ＩＲ５８０２５Ｂ龙晚１号／Ｔｅｔｅｐ　Ｌｏｎｇｗａｎ１／Ｔｅｔｅｐ钢枝占／珍汕９７　Ｇａｎｇｚｈｉｚｈａｎ／Ｚｈｅｎｓｈａｎ９７Ⅱ－３２Ｂ／协青早Ｂ　Ⅱ－３２Ｂ／ＸｉｅｑｉｎｇｚａｏＢ不详　Ｕｎｋｎｏｗｎ丛广４１／早熟泰引１号　Ｃｏｎｇｇｕａｎｇ４１／Ｚａｏｓｈｕｔａｉｙｉｎ１农垦５８Ｓ／（培矮Ｆ／测６４－７）　Ｎｏｎｇｋｅｎ５８Ｓ／（Ｐｅｉ′ａｉＦ／Ｃｅ６４－７）７７Ｎ４２２Ｓ／矮广占６３／／扬稻６号　Ｎ４２２Ｓ／Ａｉｇｕａｎｇｚｈａｎ６３／／Ｙａｎｇｄａｏ６福引１号系选　Ｆｕｙｉｎ１明恢６３／测６４－７　Ｍｉｎｇｈｕｉ６３／Ｃｅ６４－７ＩＲ９７６１－１９系选　ＩＲ９７６１－１９龙野５－３／（ＩＲ６６１／ＩＲ２０６）　Ｌｏｎｇｙｅ５－３／（ＩＲ６６１／ＩＲ２０６）明恢６３／南农３００５／／（六南早Ａ／明恢６３／／０２４２８）　Ｍｉｎｇｈｕｉ６３／Ｎａｎｎｏｎｇ３００５／／（ＬｉｕｎａｎｚａｏＡ／Ｍｉｎｇｈｕｉ６３／／０２４２８）ＩＲ８／ＩＲ１３１７多系１号／黔恢４８１　Ｄｕｏｘｉ１／Ｑｉａｎｈｕｉ４８１明恢６３／ＴＤ－１／／明恢６３　Ｍｉｎｇｈｕｉ６３／ＴＤ－１／／Ｍｉｎｇｈｕｉ６３Ｃ４１８／明恢６３　Ｃ４１８／Ｍｉｎｇｈｕｉ６３１３１８／８８－Ｒ３３６０明恢６３变异株选育　Ｍｉｎｇｈｕｉ６３Ｃ５７／／３００号／ＩＲ２６　Ｃ５７／／３００／ＩＲ２６二六窄早／ＢＧ９１０－１１　Ｅｒｌｉｕｚｈａｉｚａｏ／ＢＧ９１０－１１扬稻４号／３０２１　Ｙａｎｇｄａｏ４／３０２１ＩＲ５０／明恢６３　ＩＲ５０／Ｍｉｎｇｈｕｉ６３（ＩＲ５４／明恢６３／／ＩＲ６０／圭６３０）／ＧＫ１４８／／明恢６３　（ＩＲ５４／Ｍｉｎｇｈｕｉ６３／／ＩＲ６０／Ｇｕｉ６３０）／ＧＫ１４８／／Ｍｉｎｇｈｕｉ６３６７７／ＩＲ３６七青占／七黄占　Ｑｉｑｉｎｇｚｈａｎ／ＱｉｈｕａｎｇｚｈａｎＩＲ３０／圭６３０　ＩＲ３０／Ｇｕｉ６３０

５　Ｔｅｑｉｎｇ／Ｍｉｎｇｈｕｉ７５特青／明恢７

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败型、矮败型、红莲型、印尼水田谷型、Ｄ型、冈型和新质源不育系的保持系、三系恢复系、两系恢复系等类型。

１．２　表型聚类分析的田间试验设计及分析方法

田间试验按随机区组设计，２次重复，双行区，每行１０株；行距０．３０ｍ，株距０．２５ｍ。２００４年５月１５日播于南京农业大学江浦试验站。每小区随机取１０株调查播始历期、单株最高分蘖数、单株成穗数、株高、穗长、每穗总粒数、每穗实粒数、单株产晚熟群。早、中熟群共有２１个材料，包括１５个保持系，４个早熟恢复系和２个温敏核雄性不育系，这些材料生育期较短，生长势中等偏弱，株高在１ｍ左右，平均单株产量为４３ｇ（表３）。该类群按照分类距离１３可以再分为３个亚群，第１个亚群有测６４－７等４个早熟恢复系及５个保持系，第２个亚群由８个保持系组成，但这些保持系的平均生育期要短于第１个亚群的保持系；第３个亚群含有２个温敏核雄性不育系培矮６４Ｓ和６３１１Ｓ，它们的生育期中等，量、剑叶长度和宽度等性状，叶鞘颜色、茎态、叶态、生长势、叶色均在分蘖盛期调查。收获时每个材料选取有代表性的１０株进行室内考种、脱粒，晒干（水分１２％）后称量，计算单株产量。所有数据进行标准化处理，聚类分析采用ＳＰＳＳ中的ＦｕｒｔｈｅｓｔＮｅｉｇｈｂｏｕｒ法进行。

．３　ＳＳＲ分子标记的实验及分析方法

采集苗期新鲜叶片，按照Ｄｅｌｌａｐｏｒｔａ等提出的

方法［８］提取基因组ＤＮＡ。利用分光光度计检测

ＮＡ的浓度和质量，并把ＤＮＡ浓度调至２０ｎｇ／μＬ备用。

采用１０μＬＰＣＲ反应体系，其中包括１μＬ１０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ，０．６μＬ２５ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２，０．２Ｌ２．５ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，０．７μＬ２ｐｍｏｌ／μＬＳＳＲ引物，０．１μＬ５Ｕ／μＬＴａｑ酶，１μＬ２０ｎｇ／μＬ模板ＮＡ，双蒸水６．４μＬ。ＰＣＲ反应程序为：９４℃下预变性５ｍｉｎ后在９４℃下变性３０ｓ、５５℃下退火３０ｓ、２℃下延伸１ｍｉｎ，共３５个循环，最后７２℃下延伸７ｍｉｎ。ＰＣＲ反应在ＰＴＣ－２００热循环仪上进行。参

照Ｃｈｅｎ等［９］的方法，将ＰＣＲ产物经８％非变性聚

丙烯酰胺凝胶电泳后，通过银染检测结果。在白炽灯下观察电泳结果，进行数据统计和扫描照相。

ＳＳＲ扩增产物以０、１、９统计建立数据库。在相同迁移位置上，有带者记为１，无带记为０，缺失数据记为９。依据Ｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ（ＧＳ）＝ｍ／（ｍ＋

）计算遗传相似系数［１０］，其中ｍ为基因型间共有

带数目，ｎ为差异带数目。按ＵＰＧＭＡ法，采用

ＮＴＳＹＳ－ｐｃｖｅｒｓｉｏｎ２．０软件［

１１］进行聚类分析。　结果与分析

．１　表型聚类分析

以４１个杂交籼稻亲本的１５个表型性状平均值未列出），利用ＦｕｒｔｈｅｓｔＮｅｉｇｈｂｏｕｒ法进行聚类分析，如图１所示。以分类距离２０为标准可将４１份材料划分为两大类群（图１、表２）：早、中熟群和中、

突出表现为分蘖力强，植株矮，抗倒性好。中、晚熟群含有１６个恢复系和４个中晚熟保持系，这些材料生育期较长，生长势强，植株高大，剑叶宽度接近２ｍ，穗大粒多，平均单株粒重达６８ｇ。以分类距离３为标准又可以把该类群分为３个亚群：第１个亚群含有６个恢复系和４个保持系，第２个亚群为９个清一色的恢复系，第３个亚群只有９３０８一个恢复系。

以上结果表明，尽管表型聚类分析不能准确反映材料之间的亲缘关系，如Ⅱ－３２Ｂ、冈４６Ｂ、Ｄ６２Ｂ、新露Ｂ和新协黄Ｂ等均属于珍汕９７Ｂ的衍生系，但６２Ｂ、新露Ｂ、新协黄Ｂ和珍汕９７Ｂ分在了早、中熟群，而Ⅱ－３２Ｂ、冈４６Ｂ却被划分到中、晚熟群。但从总体上看，表型聚类分析可以把具有明显遗传差异和不同生态类型的亲本区分开来，如早、中熟类群内材料多数是保持系，而中、晚熟类群内材料大多为恢复系。同时，具有爪哇稻背景的２个温敏核雄性不育系材料也被单独聚为一个亚群。因此，表型聚类分析能准确揭示亲本材料间在形态上的差异，而形态差异与其生态类型密切相关。因此，表型聚类分析结果对于研究不同生态类型的杂种优势配组模式具有重要参考价值。．２ＳＳＲ分子标记聚类分析

从１２６对ＳＳＲ引物中筛选出对４１个材料扩增产物具有明显多态性且带型稳定的引物６６对，分布于水稻１２条染色体上，每条染色体上平均为５．５条多态性引物。利用这些多态性引物共检测出３０１个等位基因变异位点，平均每个位点检测到的等位基因数为５．６个，变化范围２～１３个。利用３０１个多态性ＳＳＲ标记位点计算了４１个材料之间的遗传相似系数（ＧＳ），其范围在０．６４３～０．９２８，平均为．７４５（ＧＳ值未列出）。按ＵＰＧＭＡ法对供试材料进行聚类，以相似系数０．７３５为阈值将供试材料划分为两大类群，即保持系群和恢复系群（图２）。其中保持系群含有本研究所涉及的全部１９个保持系

１ｃ１Ｄ２０ＤμＤ７ｎ２２（４８０

的方法对亲本遗传差异和杂种优势的关系进行探

讨，但研究结果并不一致［

１２－１５］。本研究所采用的表型聚类分析中尽管聚类的性状较多，但生育期对分类起主导作用。生育期的不同常常会引起杂交籼稻亲本在株高、分蘖数、单株产量等性状上的差别。因此，生育期就成为表型聚类分析划分不同类群的主要指标。事实上，以生育期为主导的各种生物学性状与经济性状的表现和品种的生态类型是密切相关的。我国大面积推广的杂交籼稻大多是按照南方早籼×东南亚恢复系模式配组而成的，生态类型的差异是产生杂种优势的重要基础。所以，表型聚类分析方法对于杂交组合的亲本选配具有一定参考价值。

由于ＳＳＲ分子标记聚类的标记性状数目不受限制，不受生长发育时期和环境的影响，具有简单、快速、灵敏等优点，己经被国内外不少学者用于各种

作物种群划分和杂种优势预测［１６］。本研究中，ＳＳＲ

分子标记分类结果和系谱分析基本吻合，能从分子水平上反映各亲本之间的遗传差异和亲缘关系的远近，比表型性状分类更为深入、细致。

本研究的结果还表明，ＳＳＲ分子标记技术可以弥补系谱法分析的不足，系谱分析法不能反映育种工作中所产生的选择和突变效应，特别是选择是现代育种的主要手段。因此，单用系谱法还不能准确把握某一材料和亲本的亲缘关系，而ＳＳＲ分子标记可以检测到材料之间在ＤＮＡ水平上的遗传差异，比如协青早Ｂ和金２３Ｂ杂交育成金协Ｂ，协青早Ｂ和Ⅱ－３２Ｂ杂交选出了Ⅱ协Ｂ。单从系谱关系上，无法判断后代与哪个双亲更相似，而通过ＳＳＲ标记检测发现，金协Ｂ与协青早Ｂ、Ⅱ协Ｂ与Ⅱ－３２Ｂ相似性更高。同时，ＳＳＲ分子标记技术还可以把系谱不清、来源不明的品种划分到相应的类群中，从而为更好地利用这些材料提供指导。因此，系谱分析法、ＳＲ分子标记技术以及表型聚类相结合将会进一步完善品种的遗传多样性研究技术。

杂种优势群就是一群具有密切关系的近交系，群内材料间的共祖程度高，而两个杂种优势群之间的材料共祖程度常常很低。一般来说，一个杂种优势群内的种质与其他杂种优势群内的种质杂交，Ｆ１倾向于表现为较强的（平均）杂种优势，而同一杂种优势群内的种质之间杂交，Ｆ１所产生的杂种优势较

弱［

１７－１８］。杂种优势群理论对于提高亲本选配效率具有重要指导作用［１９－２０］。目前，在水稻育种上，水

稻杂种优势群的研究尚处于起步阶段。根据杂种优

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势群的定义并结合杂交籼稻育种的实际情况，本研究利用ＳＳＲ分子标记所划分的几大类群、亚群内的材料大多是某一品种的衍生系，共祖程度高，而类群、亚群间的共祖程度相对较低。因此，本研究的ＳＳＲ分类结果可能会为籼稻杂种优势群的划分提供有价值的信息。下一步，我们将根据本研究的结果对群间和亚群间的材料进行配合力分析及杂种优势测定，探索应用ＳＳＲ分子标记聚类划分杂交籼稻亲本杂种优势群和构建杂种优势利用模式的可行性。参考文献：

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ｓａｔｅｌｌｉｔｅｆｒａｍｅｗｏｒｋｍａｐｐｒｏｖｉｄｉｎｇｇｅｎｏｍｅ－ｗｉｄｅｃｏｖｅｒａｇｅｉｎｒｉｃｅ（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）．ＴｈｅｏｒＡｐｐｌＧｅｎｅｔ，１９９７，９５：５５３－５６７．［１０］ＲｏｈｌｆＦＪ．ＮＴＳＹＳ－ｐｃ：Ｎｕｍｅｒｉｃａｌｔａｘｏｎｏｍｙａｎｄｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅ

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ｍａｒｋｅｒｓｉｎｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｈｙｂｒｉｄｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｈｅｔｅｒｏｓｉｓｆｏｒａｔｈｒｅｅ－ｌｉｎｅｓｙｓｔｅｍｉｎｒｉｃｅ．ＢｉｏｃｈｌＧｅｎｅｔ，２００１，３９（５／６）：１７９－２００．［１６］ＺｈａｎｇＱＦ，ＧａｏＹＪ，ＭａｒｏｏｆＭＡＳ，ｅｔａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｉｖｅｒ－

ｇｅｎｃｅａｎｄｈｙｂｒｉｄｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｉｎｒｉｃｅ．ＭｏｌＢｒｅｅｄｉｎｇ，１９９５，１：１３３－１４２．［１７］ＨｏｎｇｔｒａｋｕｌＶ，ＨｕｅｓｔｉｓＧＭ，ＫｎａｐｐＳＪ．Ａｍｐｌｉｆｉｅｄｆｒａｇｍｅｎｔ

ｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓａｓａｔｏｏｌｆｏｒＤＮＡｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇｓｕｎ－ｆｌｏｗｅｒｇｅｒｍｐｌａｓｍ：ｇｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｍｏｎｇｏｉｌｓｅｅｄｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅｓ．ＴｈｅｏｒＡｐｐｌＧｅｎｅｔ，１９９７，９５：４００－４０７．［１８］Ｓｅｇｏｖｉａ－ＬｅｒｍａＬ，ＭｕｒｒａｙＷ，ＴｏｗｎｓｅｎｄＭＳ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ－

ｂａｓｅｄｄｉａｌｌｅｌａｎａｌｙｓｅｓａｍｏｎｇｎｉｎｅｈｉｓｔｏｒｉｃａｌｌｙｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄａｌｆａｌｆａｇｅｒｍｐｌａｓｍｓ．ＴｈｅｏｒＡｐｐｌＧｅｎｅｔ，２００４，１０９：１５６８－１５７５．［１９］王懿波，王振华，王永普，等．中国玉米主要种质杂交优势利

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