穿山龙地上部分和根茎总皂苷抗炎活性比较

第１５卷第４期　２００９年４月　河　北　医　学　ＨＥＢＥ１　ＭＥＤ１ＣＩＮＥ　Ｖｏ１．１５，Ｎｏ．４　Ａｐｒ．，２００９　９７．３％、９９．２％、１００．４％、９８．７％，均＜１００％±５％。　显影响，血红蛋白＜４ｇ／Ｌ对ＡＬＴ测定结果无明显影　响。胆红素＜３００ｕｍｏｌ／Ｌ对６个项目测定结果均无影　３讨论　近年来，由于检验医学的发展，医院检验科工作量　加大，结果的精密度、准确度要求更高。ＢＥＣＫＭＡＮ　ＳＹＮＣＨＲＯＮ—ＬＸ２０全自动生化分析仪是美国Ｂｅｃｋ—　ｍａｎ　Ｃｏｕｌｔｅｒ仪器公司推出的一款针对大标本量实验　响，回收率均在１００％±５％以内，说明该仪器准确度　高；该仪器采用移动式清洗站，为环状包裹的设计，可　以有效地降低吸样针的携带污染，本试验较低的交叉　污染率表明此设计可以提高仪器的准确性；线性实验　表明该仪器线性良好。　室设计的生化分析仪，由模块部分（ＭＣ部分）和试剂　盒部分（ＣＣ部分）组成，其中ＭＣ部分为快速反应部　分，特别是电解质电极部分独具特色，具有易于保养、　便于维护、使用寿命长等特点。该仪器能同时测定４１　个检测项目，具有智能模块、光纤通讯、远程诊断等独　特性能，能提供包括急诊生化、常规生化、特殊生化、免　疫蛋白、治疗药物监测及滥用药物等测试项目，并对急　诊项目能随时添加、随时测定，同时能进行数据的自动　接收、条码管理、中文软件管理及先进的数据管理系　统，提高了工作效率及检验质量，最大测试速度为　１４４０ｔｅｓｔｓ／ｈ　Ｊ。本科共开展３４个常规生化检测项目，　其中ＣＣ部分的项目在日常工作中占的比重较大，通　综上所述，该仪器具有测试速度较快、携带污染率　低、精密度和准确度高的特点，各项指标参数均符合仪　器设定的要求，也达到了国家规定的标准。　参考文献：　［１］　徐国宾，蒋琳．临床生物化学常规定量方法的分　析性能评价［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００７，３０　（６）：７１８—７２０．　［２］　李海霞，王学晶，徐国宾，等．两种不同检测系统　测定半胱氨酸蛋白酶抑制剂Ｃ的方法学评价　［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００７，３０（１１）：１２８４—　１２８７．　过２年多的观察，平均测试速度大约只有７２０　ｔｅｓｔｓ／ｈ，　因此该仪器更适合于中型医院使用。　通过试验得知，ＢＥＣＫＭＡＮ　ＳＹＮＣＨＲＯＮ—Ｉ＿Ｘ２０全　［３］　熊立凡，李树仁，丁磊成，等．临床检验基础　［Ｍ］．第３版．北京：人民卫生出版社，２００３．６４．　［４］　韩志钧，黄志锋，卢业成．临床化学常用项目自　动分析法［Ｍ］．第３版．沈阳：辽宁科学技术出　版社，２００３．１０５０．　自动生化分析仪总ｃｖ均＜５％，表明该仪器精密度良　好；抗干扰性强，血红蛋白＜１０ｇ／Ｌ对ＧＬＵ、Ｃｒ、ＴＧ测　定结果无影响，血红蛋白＜８ｇ／Ｌ对ＴＰ测定结果无明　文章编号：１００６－６２３３（２００９）０４－０３８１一ｏ３　穿山龙地上部分和根茎总皂苷抗炎活性比较　佟继铭，　杨宇杰，　石艳华，　刘玉玲，　陈光晖　（承德医学院中药研究所，　河北　承德０６７０００）　摘　要：目的：比较分析穿山龙地上部分和根茎总皂苷抗炎活性，为穿山龙地上部分的开发利用　提供实验依据。方法：采用小鼠耳廓肿胀实验、小鼠棉球肉芽肿法和小鼠腹腔液渗出法对同时、同地　采收的穿山龙地上部分和根茎水提取物的抗炎作用进行比较研究。结果：穿山龙地上部分总皂苷（ｔｏ—　ｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｆ　ａｅｒｉａｌ　ｐａｒｔ　ｏｆ　Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ　ｎｉｐｐｏｎｉｅａ　Ｍａｋｉｎｏ，ＴＳＡＰＤＮ）可明显减轻小鼠耳肿胀，降低肉芽肿　的重量，减少小鼠腹腔液的渗出，与空白对照组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０５～０．００１）；与根茎总皂苷　（ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｆｔｈｅ　ｒａｄｉｅｕｌａｒ　ｏｆＤｉｏｓｃｏｒｅａ　ｎｉｐｐｏｎｉｃａ　Ｍａｋｉｎｏ，ＴＳＲＤＮ）比较差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。　结论：ＴＳＡＰＤＮ有显著的抗炎作用，其抗炎活性与根茎相近。　关键词：　穿山龙；地上部分；　总皂苷；抗中图分类号：Ｒ２８４．１　文献标识码：Ａ　炎　Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ａｎｔｉ－－－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｆ　Ａｅｒｉａｌ　ｐａｒｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒａｄｉｃｕｌａｒ　ｏｆ　Ｄｏｉｓｃｏｒｅａ　Ｎｉｐｐｏｎｉｃａ　Ｍａｋｉｎｏ　・３８ｌ・　第ｌ５卷第４期　河　北　医　学　Ｖ０１．１５．Ｎｏ．４　２０Ｏ９年４月　ＨＥＢＥＩ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ａｐｒ．，２ＯＯ９　ＴＯＮＧ　Ｊｉ—ｍｉｎｇ．ＹＡＮＧ　Ｙｕ—ｊｉｅ。ＳＨＩ　Ｙａｎ—ｈｕａ。ｅｔ　ａｌ　（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉａ　Ｍｅｄｉｃａ　ｆｏ　Ｃｈｅｎｇｄｅ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，　Ｈｅｂｅｉ　Ｃｈｅｎｇｄｅ　０６７０００。Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｄｉｃｕｌａｒ　ｏｆ　ｄｉｏｓｃｏｒｅａ　ｎｉｐｐｏｎｉｃａ　ｍａｋｉｎｏ（ＴＳＲＤＮ）ｗａｓ　ａｃ—　ｔｅｄ　ａｓ　ｃｏｎｔｒａｓｔ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ａｎｔｉ—・ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｔｈｅ　ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｒｅａｓｏｎａｂｌｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｅｒｉａｌ　ｐａｒｔ　ｏｆ　ｄｉｏｓｃｏｒｅａ　ｎｉｐｐｏｎｉｃａ　ｍａｋｉｎｏ（ＴＳＡＰＤＮ）．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ　ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔ　ｗａｓ　ｅｖａｌ—　ｕａｔｅｄ　ｂｙ　ｅａｒ　ｅｄｅｍａ。ｇｒａｎｕｌｏｍａ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｃｏｔｔｏｎ　ｂａｌｌ　ａｎｄ　ｃｅｌｉａｃ　ｃａｐｉｌｌａｒｙ　ｖｅｓｓｅｌ　ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ　ｗａｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｍｉｃｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴＳＡＰＤＮ　ｃａｎ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｅａｒ　ｅｄｅｍａ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ－ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｇｒａｎｕｌｏｍａ　ｔｉｓｓｕｅ　ｎａｄ　ａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ—－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｉｎ　ｃａｐｉｌｌａｒｙ　ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ　ｉｎ　ｍｉｃｅ　ｗｈｅｎ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５—０．００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴＳＡＰＤＮ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｓｉｍｉｌａｒ　ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ａｃｔｉｖｉｉｔｅｓ　ｗｈｅｎ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ＴＳＲＤＮ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ　ｎｉｐｐｏｎｉｃａ　ｍａｋｉｎｏ；　Ａｅｒｉａｌ　ｐａｒｔ；Ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎｓ；　Ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　穿山龙，别名野山药、串地龙、地龙骨等，为薯蓣科　同一部位冲下耳片，称重，以左右耳片重量差值表示炎　薯蓣属植物，传统药用其根茎。现代药理研究证明其　性肿胀程度。　有调节免疫，改善心血管功能，镇咳平喘，祛痰等多种　２．２醋酸致小鼠腹腔毛细血管渗出实验：昆明种小鼠　作用…。穿山龙根茎一般三年才可采收，每年大量的　４０只，体重２０～２２ｇ，禁食１２ｈ，不禁水，随机分为　地上部分被废弃，造成药材资源的大量浪费。为了开　ＴＳＡＰＤＮ　２．Ｏｇ／ｋｇ组、ＴＳＲＤＮ　２．０ｇ／ｋｇ、阿斯匹林　发利用穿山龙的地上部分，本课题组首先对不同采收　１５０ｍｇ／ｋｇ组及空白对照组。口服给药，给药容积０．　期的穿山龙根茎及地上部分中薯蓣皂苷元的含量进行　２ｍｌ／ｌＯｇ。空白对照组给予等容积蒸馏水，连续７ｄ。　了比较分析，结果显示８～９月份采收穿山龙根茎和　末次给药后４０ｍｉｎ，每只小鼠尾静脉注射０．５％的依文　地上部分薯蓣皂苷元的含量均较高　Ｊ。为了评价穿　氏蓝生理盐水溶液０．２ｍｌ，并立即肌注０．６％ｒａｌ醋酸　山龙地上部分的药理活性，本研究对９月份采收于河　溶液０．２ｍｌ，２０ｍｉｎ后处死动物，轻揉腹部３０ｓ，５ｍｉｎ后　北省兴隆县的穿山龙地上部分和根茎提取的总皂苷抗　剪开腹部皮肤和肌肉，用吸管吸取腹腔液，３０００ｒ离心　炎活性进行了比较研究。　１５ｍｉｎ，取上清液，于７２１分光光度计（５９０ｎｍ）测定吸　１材料　光度。　１．１药材：穿山龙根茎及地上部分，２００５年９月采自　２．３小鼠棉球肉芽肿实验　河北省兴隆县，穿山龙地上部分和根茎水提取总皂苷　２．３．１　制备灭菌棉球：以分析天平精确称取脱脂棉　均由承德医学院中药研究所制备，根茎取提总皂苷取　１００份，每份５ｍｇ，团成形状和表面积基本相同的球　率为１９．３７％，地上部分总皂苷提取率为１０％；阿斯　形。以１．５ｋＰａ压力高压灭菌２０ｍｉｎ，每个棉球加氨苄　匹林（石家庄康力制药厂，批号：０７０８１０）；依文思蓝　青霉素１ｍｇ／０．１ｍｌ　５０ｏＣ烘干，备用。　（国药集团化学试剂有限公司，２００６０６２６）。　２．３．２植入棉球：昆明种小鼠４Ｏ只，体重２０—２２ｇ，　１．２实验动物：昆明种小鼠，雄性，体重：２０～２２ｇ，中　２０％乌拉坦浅麻醉，剪掉胸部毛，碘伏消毒，在无菌条　国医学科学院实验动物研究所繁育场提供（合格证　件下胸部开一小口，将灭菌棉球植入两侧腋窝部皮下。　号：ＳＣＸＫ（京）２００４—０００１）　术后随机将大鼠分为ＴＳＡＰＤＮ２．Ｏｇ／ｋｇ组、ＴＳＲＤＮ　２．　２方法　Ｏｇ／ｋｇ组、阿斯匹林１５０ｍｇ／ｋｇ组和空白对照组。手术　２．１　二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀实验：昆明种小鼠４Ｏ　当天开始灌胃给药，给药容积为０．２ｍｌ／ｌＯｇ，连续给药　只，体重２０—２２ｇ，禁食１２ｈ，不禁水，随机分为ＴＳＡＰ—　７ｄ，ｄ８颈椎脱臼处死，取出肉芽肿组织，置于烘箱中　ＤＮ（２．ｏｇ／ｋｇ）组、ＴＳＲＤＮ（２．０ｇ／ｋｇ）组、阿斯匹林　９０％干燥１ｈ，称重，减去５ｍｇ棉球重量为肉芽肿净　（１５０ｍｇ／ｋｇ）组及空白对照组。各组连续口服给药７ｄ　重　引。　（给药容积０．２ｍｌ／ｌＯｇ，空白对照组给予等容积蒸馏　２．４统计学处理：实验数据以ｘ±Ｓ表示，数据处理采　水）。末次给药ｌｈ后，各鼠右耳滴２０１￣１二甲苯致炎，　用组间ｔ检验比较各组间差异的显著性。　２ｈ后处死动物，剪下左右两耳，用直径６ｍｍ打孔器在　３结果　・３８２・　第１５卷第４期　２００９年４月　河　北　医　学　ＨＥＢＥＩ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｖｏ１．１５，Ｎｏ．４　Ａｐｒ．，２００９　３．１　ＴＳＡＰＤＮ对小鼠耳廓肿胀度的影响：如表１所　示，ＴＳＡＰＤＮ能明显抑制小鼠耳肿胀，且与ＴＳＲＤＮ比　较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。　表１　ＴＳＡＰＤＮ对小鼠耳廓肿胀的影响（ｉ±ｓ，ｎ＝１０）　与对照组比较，　Ｐ＜０．０５，｝　Ｐ＜０．０１，　｜ｔ十　Ｐ＜　０．００１；与ＴＳＲＤＮ比较，△Ｐ＞０．０５　４讨论　穿山龙根茎为常用中药材，具有祛风除湿、舒筋活　血、止咳化痰之功效，主要用于治疗风湿痹痛、腰腿疼　痛，劳损扭伤，现代药理研究表明，其主要成分总皂苷　具有改善冠脉循环、增加冠脉流量、抗动脉粥样硬化、　抗炎镇痛等作用【４】。穿山龙的主要有效成分一薯蓣　组别　剂量（　ｋｇ）　肿胀度（ｍｇ）　抑制率（％）　皂苷水解后产生薯蓣皂苷元，是制备７Ｏ多种甾体激素　和性激素的原料，提取有效成分后残渣可以加工成　与对照组比较。｜ｃ・Ｐ＜０．０１；与ＴＳＲＤＮ比较，△Ｐ＞０．　ＣＭＣ，广泛用于纺织业和医药业。穿山龙根茎用途广　Ｏ５　泛，市场需求量大，药源紧缺，野生资源几近枯竭。承　３．２　ＴＳＡＰＤＮ对小鼠腹腔毛细血管渗出的影响：如表　德地区不仅是野生穿山龙的主产区，也是穿山龙主要　２所示，ＴＳＡＰＤＮ组小鼠腹腔毛细血管渗出液的吸光度　种植基地。由于穿山龙是多年生植物，其根茎一般三　明显低于空白对照组，与对照组比较具有显著性差异　年才可采收，而每年可采收的地上部份均被废弃，造成　（Ｐ＜０．０５）；与ＴＳＲＤＮ比较差异无显著性（Ｐ＞０．　药材资源的大量浪费；为了充分开发利用穿山龙资源，　Ｏ５）。　本课题组对不同生长期的穿山龙根茎和地上部分中薯　表２　ＴＳＡＰＤＮ对小鼠腹腔毛细血管渗出的影响（；±ａ　ｓｎ＝１０）　蓣皂苷元的含量分析证明，９—１１月份根茎中薯蓣皂　苷元的含量最高，可达２％以上（２．２６１、２．５７６、２　０５１％），８—９月份其地上部分薯蓣皂苷元的含量与根　茎相近（２．２９４％、２．１１７％）　Ｊ。为了评价地上部分水　提取物的药理活性，本文采用小鼠耳肿胀法、腹腔毛细　血管渗出法及棉球肉芽肿法对ＴＳＡＰＤＮ的抗炎活性进　行了评价，结果显示＇ＰＳＡＰＤＮ对小鼠耳肿胀、炎症早期　与对照组比较，　Ｐ＜０．０５；与ＴＳＲＤＮ比较，△Ｐ＞０．０５　的毛细血管渗出增加和晚期的肉芽组织增生均有明显　３．３　ＴＳＡＰＤＮ对小鼠棉球肉芽肿重量的影响：如表３　的抑制作用，且其抗炎活性与ＴＳＲＤＮ相近，提示穿山　所示，ＴＳＡＰＤＮ、ＴＳＲＤＮ及阿斯匹林组小鼠棉球肉芽肿　龙地上部分与其根茎同样具有很高的开发利用价值　的重量均明显降低，与空白对照组比较具有显著性差　参考文献：　异（Ｐ＜０．０５～０．００１）；ＴＳＡＰＤＮ与ＴＳＲＤＮ比较差异　［１］　南景一．穿山龙对小鼠免疫功能的影响［Ｊ］．中　无显著性（Ｐ＞０．０５）。　草药，１９８８，１９（３）：２２．　表３　ＴＳＡＰＤＮ对小鼠棉球肉芽肿重量的影响（ｉ±Ｓ。ｎ＝１０）　［２］　赵春颖，佟继铭，刘玉翠．穿山龙根茎叶不同生　组别　剂量（ｇ／ｋｇ）肉芽肿重量（ｍｇ　中胀抑制率（％）　长期薯蓣皂苷元的含量测定［Ｊ］．承德医学院　学报，２００８，２５（２）：１２７—１２９．　［３］　陈奇．中药药理研究方法学［Ｍ］．北京：人民卫　生出版社，１９９４．１０７—１０８．　［４］　王本祥．现代中药药理学［Ｍ］．天津：科学技术　出版社，１９９７．４７２—４７３．　－３８３・