TopoⅡα在乳腺癌中的表达与蒽环类药物敏感性的分析

３９０　司Ａｅｔａ　Ａｃａｄ　Ｍｅｄ　Ｗｅｉｆａｎｇ　Ｖｏ１．３５　Ｎｏ．５　２０１３　化ｓＰ法，所有标本均经１０％甲醛固定，石蜡包埋，连续切片　４　ｍ厚，切片常规用３％Ｈ：０：溶液作用２０ｒａｉｎ，高压修复抗原，　依次加入Ｉ抗、Ⅱ抗，ＤＡＢ显色，苏木素复染后封片观察。用　ＴＢＳ代替一抗作阴性对照，用已知阳性的乳腺癌组织作阳性对　照。　用Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ法进行单因素生存分析和Ｌｏｇ—ｒａｎｋ　ｔｅｓｔ进行差　异显著性检验，Ｏｔ：０．０５。　２结果　２．１乳腺癌组织中ＴｏｐｏＩ１　０【的表达状况ＴｏｐｏⅡ０ｌ阳性物质呈清晰棕黄色或黄色，分布　ＴｏｐｏｌＩⅨ阳性物质　１．３结果判定呈清晰棕黄色或黄色，分布于胞核内。在６３例乳腺癌组织中，　有４６例ＴｏｐｏＩ１　０【表达阳性，阳性表达率为７３．０％（见图１、图　２）。　于胞核内。每张切片中选择５个高倍视野，阳性细胞数≥２０％　为（＋），＜２０％为（一）。　１．４疗效判断采用国际规定的ＲＥＣＩＳＴ实体瘤疗效评价标　２．２　５７例术后应用蒽环类药物辅助化疗后复发转移的乳腺癌　组织中ＴｏｐｏＩＩ　的表达及其与各临床病理指标的关系　在５７　准。ＣＲ：所有目标病灶消失；ＰＲ：基线病灶长径总和缩小＞　３０％；ＰＤ：基线病灶长径总和增加＞２０％或出现新病灶。ＳＤ：　例术后应用蒽环类药物辅助化疗后复发转移的乳腺癌组织中，　ＴｏｐｏⅡ０ｌ的阳性表达率为７３．７％（４２／５７）。通过对ＴｏｐｏⅡ　的　表达及其与各临床病理指标的关系的分析中可以看出：ＴｏｐｏⅡ　基线病灶长径总和有缩小但未达ＰＲ或有增加但未达ＰＤ。所　有病例均有可测量的目标病灶，每２个化疗周期后进行疗效评　价。ＣＲ＋ＰＲ为有效，ＰＤ＋ＳＤ为无效。　０【的表达与患者发病年龄、肿瘤大小、位置、有无腋窝淋巴结转　移及ＥＲ，ＰＲ的表达均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。而ＴｏｐｏⅡ　的阳性表达与Ｈｅｒ－２的表达有统计学意义，且成正相关性（Ｐ＝　０．０２６），见表１。　１．５统计学方法采用ＳＰＡＳＳ　１９．０软件，Ｔｏｐｏ１Ｉ　Ｏ，／的表达与　临床病理指标的关系采用　检验和Ｆｉｓｈｅｒ确切概率法。无病　生存期（１，Ｉ１Ｐ）是指从手术之日起到疾病复发或转移的时间。应　表１　Ｔｏｐｏ　Ｉ１　０【表达与临床病理学参数的关系　２．３乳腺癌患者ＴｏｐｏⅡ　表达与蒽环类化疗效果之间的关系　２．４　５７例术后应用蒽环类药物辅助化疗后复发转移的乳腺癌　在２１例一线应用蒽环类药物化疗的乳腺癌患者中，对于应　用含有蒽环方案有效的患者，其肿瘤组织ＴｏｐｏⅡ０【阳性表达明　显高于无效者；ＴｏｐｏⅡ０【阳性表达者应用含蒽环药物化疗有效　率是ＴｏｐｏＩ１　阴性表达者的３．０７７倍（Ｐ＝０．０３２＜０．０５）。　表２　Ｔｏｐｏ　Ｉ１　０【表达与含蒽环类药物治疗方案的关系　患者无病生存期（ＴＴＰ）与Ｔｏｐｏ　１１　Ｏｔ表达情况的分析对５７例　术后应用蒽环类药物辅助化疗后复发转移的乳腺癌应用Ｋａｐ—　ｌａｎ—ｍｅｉｍｅｒ单因素生存分析后发现，ＴｏｐｏⅡ仅表达阳性组的中　位ＴＴＰ为３２．５个月，而ＴｏｐｏⅡ０ｌ表达阴性组的中位ＴＴＰ为ｌ９．　８个月，两组之间的差异具有统计学意义（Ｐ＝０．０１０）（见图３）　３讨论　Ｔｏｐｏ　１１　０【是一种调节核酸空间结构动态变化的、控制核酸　生理功能的关键酶，普遍存在于多种细胞的酶类…。ＴｏｐｏⅡ　基因位于人染色体１７ｑ２１．３，存在于增殖细胞中，其表达具有周　期特异性。Ｓａｓａｎｏ等　研究报道Ｔｏｐｏ　Ｉ１　０【在肿瘤增殖的细胞　●潍坊医学院学报２０１３年第３５卷第５期　３９１　周期中的各期表达不同，在ＤＮＡ复制后期和有丝分裂期为表　达高峰期，而在有丝分裂期结束后表达下降，因而推测ＴｏｐｏⅡ０【　的表达可能与肿瘤增殖相关。也有研究表明，Ｔｏｐｏ　ＩＩ　在乳腺　癌组织中的表达与其预后存在一定的关系，Ｔｏｐｏ　１１　的阳性表　达与腋窝淋巴结转移和远处转移关系密切，而与其他临床病理　因素的关系结果不一致，由此推断Ｔｏｐｏ　ＩＩ　阳性表达可能提示　预后不良。因实验样本的数量及研究方法不同，所得的结论可　能不尽一致。本实验发现在６３例乳腺癌组织中，有４６例Ｔｏｐｏ　Ｉ１仅表达阳性，其阳性表达率为７３．０％．本研究还通过对Ｔｏｐｏ　因缺失预后较差，因而Ｔｏｐｏ　１Ｉ仅可作为预测无病生存期和总生　存期的生物学标志　。但是也有学者认为，接受蒽环类药物的　早期乳腺癌的无病生存期和总生存期与ＨＥＲ２高表达有关，却　与ＴｏｐｏＩ１　Ｏｒ．改变没有相关性　Ｊ。还有多项研究报道，Ｔｏｐｏ　ＩＩ　表达阳性的患者术后应用蒽环类药物辅助化疗的无病生存率　和总生存率显著高于阴性表达者。本研究采用Ｋａｐｌａｎ—ｍｅｉｍｅｒ　单因素生存分析法对５７例术后应用蒽环类药物辅助化疗后复　发转移的乳腺癌患者进行分析发现，Ｔｏｐｏ　ＩＩ　Ｏ－阳性表达组的无　病生存期明显长于ＴｏｐｏＩＩ　阴性表达组（Ｐ＝０．０１０）。因此，通　过对乳腺癌患者中Ｔｏｐｏ　Ｉ１　０【表达的检测，正确的选用化疗敏感　Ｉ１　０ｌ的表达与临床诸病理因素进行分层分析发现，Ｔｏｐｏ　ＩＩ仪表　达与患者的年龄、肿瘤大小、位置、有无腋窝淋巴结转移和ＥＲ，　ＰＲ的表达均无明显相关性，与刘芳等　的研究结果不同。而　ＴｏｐｏＩ１　０ｌ在Ｈｅｒ．２阳性的乳腺癌中的阳性表达率（８７．５０％）明　显高于其在Ｈｅｒ一２阴性的乳腺癌中的阳性表达率（６０．６１％，Ｐ＜　０．０５），两者且成正相关性，这可能与两者的位置非常接近有　关。Ｈｅｒ．２基因的突变了引起基因扩增和过度表达，从而导致　ＴｏｐｏＩＩ　Ｏｒ．基因出现异常。因此，这两种基因的改变有一定的关　联性。有研究者报道，Ｈｅｒ－２阳性表达的乳腺癌患者中，存在　３８％的患者同时伴有Ｔｏｐｏ　ＩＩ仪过表达，且这一部分病人对蒽环　类药物治疗的敏感性高　Ｊ。据报道，在Ｈｅｒ－２和Ｔｏｐｏ　ＩＩ　均阳　性表达的转移性乳腺癌中，联合应用赫赛汀与Ｔｏｐｏ　ＩＩ　抑制剂　可以明显提高化疗的疗效。因此联合检测Ｔｏｐｏ　１１　ｄ和Ｈｅｒ－２等　相关指标在指导临床用药上具有重要意义。　目前以Ｔｏｐｏ　ＩＩⅨ为靶点的化疗药物已普遍应用于乳腺癌　临床治疗工作中，其主要作用机制是药物与Ｔｏｐｏ　Ｉ１仅结合后，　通过抑制肿瘤细胞ＤＮＡ的复制，从而阻碍了肿瘤细胞的增殖。　而Ｔｏｐｏ　ＩＩ　作为蒽环类药物的潜在作用靶点，肿瘤对葸环类药　物的敏感性很大程度上取决于ＴｏｐｏⅡＯ／．酶活性或者其在肿瘤　细胞内表达水平的高低，酶活性升高或者其表达水平增高，可　使肿瘤对化疗药物的敏感性增加，从而使得肿瘤细胞的耐药性　降低　Ｊ。很多研究发现Ｔｏｐｏ　Ｉ１　０ｌ蛋白表达或者基因异常与蒽　环类药物在各种治疗方法的疗效预测有关，本研究对２１例一　线应用蒽环类药物化疗的乳腺癌患者进行分析发现，对于应用　含有蒽环方案有效患者，的ＴｏｐｏⅡｄ阳性表达率（７６．９２％）明　显高于无效者（２５．０ｏ％）；ＴｏｐｏＩ１　０ｌ阳性表达者应用含蒽环药物　化疗有效率是ＴｏｐｏＩＩ　阴性表达者的３．０７７倍（Ｐ＝０．０３２＜０．　０５），这一结果和国内外多项研究相似　。因此，在化疗前通过　对该基因进行检测，有助于判断蒽环类药物疗效，从而更好地　为患者选择合适的化疗方案。　化学治疗在乳腺癌的综合治疗中起着重要作用，其中蒽环　类药物一直是乳腺癌化疗药物中的基石。而ＴｏｐｏⅡ　抑制剂　（如蒽环类药物）的应用大大提高了乳腺癌患者的生存率。有　研究表明，在接受含蒽环类化疗药物乳腺癌患者中，ＴｏｐｏⅡ０【基　因扩增与正常的相比可使复发率和死亡率显著降低，而且该基　性的药物，可以明显延长患者的无疾病生存期。　综上所述，本实验通过对６３例乳腺癌组织中ＴｏｐｏⅡＯｒ，表达　的回顾性研究得出，化疗前如果应用免疫组织化学法检测Ｔｏｐｏ　ＩＩ　蛋白的表达水平，不仅可以对乳腺癌患者进行较为准确的　个体化分析和评价，有目的地选择抗肿瘤药物，而且可以减少　肿瘤对蒽环类药物耐药性的发生，从而提高化疗药物的敏感　性，最终达到提高乳腺癌患者无病生存期和总生存期的目的。　（本文图１—３见封三）　［参考文献］　［１］张军，周晓红．替尼泊试抗口腔肿瘤作用的进展［Ｊ］．中国医药科　学，２０１２，１０（２）：２７—２８．　［２］　Ｓａｓａｎｏ　Ｈ，Ｙａｂｕｋｉ　Ｎ，Ｋａｔｏ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔ０ｃｈｅｍｉｃａ１　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ＤＮＡ　ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ　ＩＩ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｇａｓｔｉｒｃ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ［Ｊ］．Ａｍ　Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，１９９６，　１４９（３）：９９７～１００７．　［３］刘芳，冯胜强，孙军仲．乳腺癌相关生物学指标对紫杉类药物治疗　晚期乳腺癌疗效预测作用分析［Ｊ］．中华肿瘤防治杂志，２００６，１３　（９）：６８５～６８８．　［４］Ｍａｎｏ　ＭＳ，Ａｗａｄａ　Ａ，ＤｉＬｅｏ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｒａｔｅｓ　ｏｆＴＯＰＯｃ－ｌａｐｈａ　ａｎｄ　ＨＥＲ－　２　ｇｅｎｅ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　［Ｊ］．Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２００４，９２（６）：８８７～８９５．　［５］　桑晶，韩玉贞，张志强．三阴性乳腺癌组织耐药蛋白ＧＳＴ－ｎ和ＬＲＰ　及ＴｏｐｏｌＩ．ｄ表达的研究［Ｊ］．中华肿瘤防治杂志，２０１１，１８（７）：　５２１～５２３．　［６］　Ｇｌｙｎｎ　ＲＷ，Ｍｉｌｅｒ　Ｎ，Ｗｈｅｌａｎ　ＭＣ，ｅｔ　ａ１．Ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ　２　ａｌｐｈａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃａｓｅ　ｆｏｒ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄ　ｂｒｅａｓｔ　ｃ￣ｒｌｃｅｒ　ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ａｎｎ　Ｓｕｒｇ　Ｏｎｃｏｌ，　２０１０，１７（５）：１３９２—１３９７．　［７］Ｎｉｅｌｓｅｎ　ＫＶ，Ｅｊｌｅｓｓｅｎ　Ｂ，Ｍｔｐｌｌｅｒ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．ｈｅ　ｖａｌｕｅ　ｏｆＴＯＰ２Ａ　ｇｅｎｅ　ｃｏｐｙ　ｎｕｍｂｅｒ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ａｓ　ａ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｉｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ：Ｕｐｄａｔｅ　ｏｆ　ＤＢＣＧ　ｔｉｒ—　ｌａ　８９Ｄ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｏｎ—ｃｏｌ，２００８，４７（４）：７２５～７３４．　［８］Ｔｕｂｂｓ　Ｒ，Ｂａｒｌｏｗ　ＷＥ，Ｂｕｄｄ　ＧＴ，ｅｔ　ａ１．Ｏｕｔｃｏｍｅ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｅａｒｌｙ—　ｓｔａｇｅ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ－ｂａｓｅｄ　ａｄｊｕｖａｎｔ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ－　ａｐｙ　ａｓ　ａ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆＨＥＲ２　ａｎｄ　ＴＯＰ２Ａ　ｓｔａｔｕｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｏｎｃｏｌ，２００９，　２７（２４）：３８８１～３８８６．　［收稿日期］２０１３—０６—１４