武 汉 大 学2001分子生物学
一.解释概念(20分,每个4分)
卫星DNA 复制体 逆转座子 反式激活因子 衰减子与衰减作用
三、问答题(50分)
1. 说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分)
2. 简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分)
3. 简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分) 4. DNA限制性切酶EcoRI是人们熟悉的常用切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分)
武 汉 大 学2002分子生物学
三.问答:
1.简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分)
2.简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分)
3.在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分)
4. 你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)
大学2003年分子生物学
一、下列名词翻译成中文，并简要解释
1、Domains and motifs 2、Alternative splicing 3、Reporter genes 4、The PCR cycle 5、Restriction mapping 6、Multiple cloning sites 7、DNA libraries 8、Proteomics 9、Replicon
10、Semi-conservative replication
二、简答题 (共5题,每题8分,共40分)
1、请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。 2、简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。
3、简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。
4、简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5、简述cDNA文库的构建过程。
三、论述题 (共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分)
1、人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？
2、什么是操纵子(operon)？试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。
3、请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。 4、试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面？
5、限制性核酸切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么？请简要说明其理由。
大学2004年分子生物学
一、名词翻译与解释
1、synonymous codons 2、RNA editing 3、Spliceosome 4、Microarray 5、Plaque hybridization 6、Open reading frame 7、Ribozyme 8、RFLP 9、Site specific recombination 10、RNA interference
二、简答题(共5小题,每小题10分,共50分)
1、简述真核生物 rRNA基因,tRNA 基因和mRNA基因的转录机制。 2、原核生物和真核生物中存在哪些类型的转座子？其转座机制有那些？
3、简述真核生物 DNA复制中,端粒复制与染色体其他部分DNA复制的异同和生物学意义。 4、原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段？简述各阶段的主要事件。
5、列举4种可用来检测,鉴定转基因动,植物的分子生物学技术和方法,简述选择这些技术的理由。
三、论述题
1、试述环境因素对DNA的损伤以及生物体中存在的DNA损伤修复系统。如果DNA损伤没有被修复会造成什么后果？
2、试比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,各结构单元的功能是什么？为什么原核生物一种RNA聚合酶能识别不同结构基因？
3、在进行基因工程时,载体是携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具,请问一个载体应具有哪些基本特性和结构特点？
4、人类基因组计划基本完成表明：人类基因组约有3×109 bp（而大肠杆菌的基因组约为4.6 ×106 bp),其中仅有百分之一的基因组DNA直接编码蛋白质,约有百分之二十四的基因组DNA为含子,而百分七十五的基因组DNA为其他非编码序列。试从(1)传代中遗传信息的
保持；(2)基因表达调空的角度来论述人类基因组如此排列的可能生物学意义。
大学2005年分子生物学
一、名解(4/10)
1、Ubiquitin
2、ribosomal binding site 3、siRNA miRNA 4、proteome
5、DNA foot printing
6、single nucleotide polymorphism 7、chromosome walking 8、haplotype 9、zoo blot
10、transcription unit
二、简答(5/10)
1、简述真核细胞rRNA 、tRNA和mRNA转录使用的聚合酶及各 RNA前体(precursor)加工的基本过程？
2、研究表明蛋白质组比基因组更复杂，蛋白质组中存在的蛋白质数目比基因组中存在的基 因数目要多许多，这是如何造成的，你如何解释这种现象？ 3、简述原核与真核细胞染色体结构的差别
4、在分子生物学研究中经常用各种载体进行研究工作，试问有哪些不同大小类型的载体,各自的主要特点是什么？
5、简述DNA损伤修复的机制,在什么情况下DNA损伤会引起DNA突变？
三、论述4/15
1、蛋白质与核酸的相互作用存在于基因表达的各个水平上,请分别举例说明在基因复制RNA转录和蛋白质翻译过程中二者的相互作用。
2、一个真核细胞的蛋白质编码基因有哪些结构元件(或组建)组成(包括各种调控元件)？请画图表示,并说名各元件的功能与作用？
3、请设计一组试验来 (1)克隆一个你所感兴趣的人类基因 (2)并对基因产物大量表达与纯化 (3)然后研究该基因的生物学功能
4、生命科学的研究已进入后基因组时代,试从“分子生物学”的角度来谈谈你对后基因组时代的认识,并预测后基因组时代里“分子生物学”发展的未来
大学2006年分子生物学
一、名解4*10
1、DNA Microarray 2、Spliceosome 3、Cosmid vector 4、Proteasome 5、Zinc finger domain 6、DNase I hypersensitivity 7、Insulator
8、Post-transcriptional gene silencing 9、Reverse transcription PCR 10、Missense mutation
二、简答题 10*5
1、简述microRNA 的基因调控功能与机制。
2、简述染色体端粒复制的问题,人正常细胞和癌细胞的端粒复制有何不同？ 3、真核生物基因组中含有几种类型的DNA序列？你如何设计实验来证明？ 4、简述RNA编辑(RNA editing)的机制及其对基因表达的影响。
5、下面的DNA序列中含有一个假象基因,编码仅5个氨基酸。请写出这些氨基酸的密码子以及终止密码子,并指出RNA转录的模版是哪条链？启动子在该序列左侧还是右侧？ 5-TCATGCTAGACACGTAATAGCATATGGGA-3 3-AGTACGATCTGTGCATTATCGTATACCCT-5
三、论述题15*4
1、论述一个真核基因产生有功能的蛋白质需要经过哪些分子生物学工程(event)？列出每个过程发生的细胞位置和参与的主要酶和蛋白因子。 2、有哪几种类型的遗传重组?其重组的特点如何？
3、DNA的甲基化在遗传信息的传递、DNA复制和DNA损伤修复等过程中有什么重要意义？请举例说明。
4、假如你进入实验室开始研究一个小鼠DNA结合蛋白的生物学功能: (1)、请设计实验确定其编码基因在小鼠细胞的表达水平？ (2)、请设计实验确定该蛋白的那个结构域具有DNA
结合功能？ (3)、如何确定该蛋白在小鼠体(in vivo)的生物学功能？
大学2007年分子生物学
一、名词翻译与解释(共10小题 ,每小题4分 ,共40分)
1、Transcriptome
2、Translesion replication 3、Riboswitch
4、Synonymous mutation 5、Tandem gene cluster 6、Frameshift
7、Nucleosome positioning 8、Non-autonomous transposon
9、Holliday junction 10、Polymerase switching
二、简答题(共5小题 ,每小题10分 ,共50分)
1、试从DNA和RNA结构的不同解释为什么DNA被广泛作为遗传信息的承载者？RNA在细胞行使哪些功能？
2、什么是蛋白质组?什么是蛋白质组学?如何理解高等生物细胞中一个基因组可以产生多少个蛋白质组？
3、什么是解旋酶(helicase)？请设计实验并画设计图证明一个DNA解旋酶是具有3’→5’还是5’→3’解旋活性？
4、论述原核生物基因表达调控的主要策略,并举例进行详细说明？
5、核糖体是蛋白质合成的主要机器。请问原核生物有哪些亚基和分子组成?核糖体在蛋白质翻译过程中有哪些功能位点？起什么作用？
三、论述题(共4小题 ,每题15分 ,共60分)
1、在真核生物中,成熟的mRNA序列往往与基因组DNA序列之间存在许多差异,有些序列甚至在基因组DNA上根本没有相应的互补序列。另外，同一种基因的DNA常常会转录出多种mRNA。请解释并说明产生这些现象的机制及其意义。
2、真核细胞mRNA的Ⅱ型RNA聚合酶转录,需要Ⅱ型启动子和转录因子TFⅡA ,TFⅡB ,TFⅡD ,TFⅡE 和TFⅡH等。(1)请设计实验证明这些转录因子和RNA聚合酶Ⅱ结合到启动子的顺序；(2)请设计实验证明TFⅡD复合体可以单独准确结合到启动子TATA box上；(3)TFⅡD复合体包括哪些蛋白质？如果你有其中一个蛋白质的抗体,并知道其他几个蛋白质的大小,请设计实验验证TFⅡD复合体的组分。
3、DNA复制具有很高的准确性(accuracy)或保真度(fidelity), 出错率低于1010 分之一。请解释: (1)DNA复制过程中和复制后有哪些机制保证复制的准确性? (2)为什么RNA聚合酶的保真度比DNA复制低? (3)DNA复制的错误或突变对生物本身有何意义?
4、两位美国科学家Fire博士和Mello博士在分子生物学研究领域做出了重大贡献,并因此获得了2006年度的诺贝尔生理与医学奖。试论述其获奖成果中发现的重要分子生物学机制以及对分子生物学研究的重要影响。
大学2008年分子生物学
一、名词翻译与解释(共10小题 ,每小题4分 ,共40分)
1、Missence mutation 2、Group I intron 3、Polysome
4、Non-Watson-Crick base pairing 5、Tandem mass spectrometry 6、Shine-Dalgarno sequence 7、tmRNA 8、allostery activation 9、Blue-white screening 10、Attenuator
二、简答题(共5小题 ,每小题10分 ,共50分)
1、请描述两个经典实验证明遗传物质是DNA而不是蛋白质。 2、翻译过程中需要哪四种组分?它们的功能是什么？ 3、在遗传物质复制、转录和翻译过程中如何确保其准确性？ 4、真核细胞转录和加工中哪些过程是相偶联的？它们是如何偶联的？
5、酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?在科学研究中有什么作用？
三、论述题(共4小题 ,每题15分 ,共60分)
1、在真核生物转录中,有哪三种序列构成核心启动子?请说明Ⅱ型启动子中有哪些因子构成起始复合替,除了这些还有哪些是构成复合体所必须的?它们各有什么功能？
2、人的基因组大概有2.5~3万个基因,但它们构成的生物体蛋白质种类却有20多万种。人的基因组是怎样以有限的基因形成如此多的蛋白质的？
3、有一研究生想使他所感兴趣的一大肠杆菌的基因严格受碳源控制,在葡萄糖供应时,该基因不表达,当供应乳糖时,该基因大量表达？你如何帮助他实现这种想法？依据是什么？ 4、miRNA在癌细胞中有的高水平表达,有的低水平表达。请解释什么是miRNA？并推测上面两种类型的miRNA各有什么生物学功能?有一种miRNA-21在癌细胞中高水平表达,请设计实验得到该miRNA的生物学功能。
大学2009年分子生物学
一、名词翻译与解释
1、Regulatory gene 2、Real-time PCR
3、Nick translation 4、Generic promoter
5、Histone code 6、Proteomics
7、Gene targeting 8、Single nucleotide polymorphism 9、Alternative mRNA processing 10、Replicon
二、简答题
1、什么是DNA损伤？生物体DNA损伤与哪些因素有关？生物细胞有哪些机制来处理DNA损伤，并进行DNA损伤修复？
2、表观（epigenetic）遗传修饰包括哪些容？并举一例说明其在基因的表达调控和染色体重塑等方面有哪些重要作用？
3、反式作用因子是直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件上参与调控靶基因转录效率的蛋白质，试问反式作用因子的DNA结合结构域有哪几种类型？特点如何？
4、PCR的原理是什么？在PCR反应中是否循环次数越多所合成的产物数量也越多？为什么？
5、增强子和绝缘子在基因表达调控中的作用和特点有哪些？
三、论述题
1、论述转座子的类别、结构和转座机制及在基因表达与分子进化中的作用。
2、在进行遗传重组和基因克隆与表达的研究中，对分子克隆的载体与宿主系统的选择有非常重要的作用。请论述各主要载体系统的特点及其宿主系统。
3、从转录后水平上进行比较，论述原核生物和真核生物RNA加工的异同点。
4、什么是HapMap计划、ENCODE计划、Jim计划、Proteome计划？这些计划与人类基因
组计划有何联系？这些计划对分子生物学的发展和生命活动的分子机制有什么影响和意义？
大学2010年分子生物学
一、名解（4*10=40）
1、epigenttic change 2、peptide mass fingerprinting 3、RNA splicing 4、house keeping gene 5、frame-shift mutation 6、DNA binding domain 7、Shine-Dlagarno sequence 8、Gel retardation
9、chromatin immunoprecipitation
10、Rho-dependent transcription termination
二、简答（5*10=50）
1、什么是CPG岛？一段DNA序列中的CPG岛高度甲基化的含义是什么？ 2、说出5种RNA的名称及其功能。 3、什么是enhancer？它有哪些特点？
4、真枋生物DNA与原核生物DNA复制有哪些差异？ 5、简述突变类型及其遗传效应。
三、论述题（3*20=60）
1、请描述乳糖操纵子的调控机制。
2、某科学家发现一种新的野生植物，准备对该植物开展分子生物学研究，请设计实验制备该植物的cDNA文库。
3、2009年三名美国科学家获诺贝尔生理或医学奖，请分析他们为什么获奖，解释他们对分子生物学的贡献。并用他们的发现解释克隆的多莉羊早衰死亡的一个原因。
2011年分子生物学真题
一、科学名词解释及翻译
1、Chromatin remodeling 2、Internal ribosome entry site 3、Alternative splicing 4、Non-autonomous transposon 5、Shine-Dalgarno sequence 6、Realtime PCR 7、Ribozyme 8、SOS response 9、Telomerase
10、Suppressor mutation
二、简答题
1、简述色氨酸操纵子的调控机制。 2、DNA在复制过程中如何保持准确性？
3、分别阐述克隆载体和表达载体（各5种）及其特点和用途。 4、什么是RNA editing？它的机制是什么？ 5、什么是染色体步移？它的作用是什么？
三、论述题
1、真核生物转录调控因子的类型和特点？阐述根据一种转录调控因子的特点建立的分子生物学技术的及其应用。
2、真核生物和原核生物的基因组的特点及差异？已知某基因的cDNA（长14Kb），如何用实验证明该生物基因还有含子？如何确定含子在全长中的比例？如何用实验确定某未知基因的功能？
3、每种基因a是诱导表达基因，在分子B（小分子化合物）的作用下可以诱导表达。已知
该基因的序列，该基因上启动子的序列。已知某调控元件的序列为ACGTCG，基因c表达的蛋白C可以结合在该调控元件上，试用三种证明该调控元件可以诱导基因a表达。
大学2012年分子生物学真题
一、专业术语翻译与解释
1、base flipping 2、RNase P
3、Histone chaperones 4、Viral-like retrotransposon 5、paracodon 6、trans-splicing 7、sliding clamp
8、initial transcribing complex
二、简答题
1、简述保证tRNA和mRNA正确配对的三种机制。 2、简述DNA复制中RNA引物的去除所需要的酶及其作用。 3、简述核糖开关的结构及其作用机制。 4、简述真核生物抑制子的作用方式。 5、简述细菌RNA聚合酶的校正机制。
三、论述题
1、从分子水平和感染条件解释λ噬菌体溶原生长途径的建立过程。
2、在你的课题研究中，你发现真核生物的A蛋白可以上调B蛋白的表达，对此你很感兴趣，请详述你将通过哪些实验进行下一步研究。
3、阻遏作用一般只能使转录效率降低70倍，为什么在色氨酸高浓度和低浓度下可以发现大肠杆菌色氨酸操纵子的表达水平相差约600倍？
2013年攻读硕士研究生入学考试试题
一、名词解释（共10小题，每题4分，共40分）
1. Ribozyme 2. Missense Mutation 3. Insulator
4. RNA trans-splicing 5. Nucleotide excision repair 6. Transposon 7. Dam methylase 8. Spliceosome 9. Core promotor 10. SNP
二、简答题（共5小题，每题10分，共50分）
1.真核生物mRNA的5’帽子结构有何生物学功能？其缺失会造成什么后果？ 2.某一基因开放阅读框中的一个碱基突变会对该基因编码产物产生什么影响？ 3.请简述真核生物的mRNA和原核生物的mRNA有何不同。 4.请简述Ⅰ型含子剪切的过程. 5.请简述Western blot 的原理和步骤。
三、论述题（共3小题，每题20分，共60分）
1. 研究基因功能通常是降低或升高基因表达水平，请简要说出三种相关研究方法及原理。 2. mRNA和蛋白质的降解是一个有序的过程，其中microRNA和泛素起了非常重要的作用，请简述microRNA的概念、产生过程、作用机制，或者泛素的概念和蛋白质泛素化的过程。 3. 某实验需将1kb的cDNA片段插入某氨苄青霉素抗性的表达载体，在片段两边各有一个EcoRI位点，靠近5’端300bp的地方有一EcoRV位点，载体多克隆位点从5’依次为BamHI、HindIIII、EcoRI、EcoRV、XhoI位点，实验设计步骤如下：
（1）用EcoRI处理载体，然后用碱性磷酸酶处理。
（2）用EcoRI处理片段，然后与步骤（1）中的载体混合，加入DNA连接酶，在适当的条件下使cDNA片段与载体连接。
（3）连接产物转化到大肠杆菌，并在含有氨苄青霉素的LB平板上生长，除此之外，还设了以下对照：
对照1：在含有抗生素的平板上涂布未被转化的大肠杆菌感受态细胞。
对照2：用未被酶切处理的载体转化大肠杆菌感受态细胞，并在含有抗生素的平板上生长。 对照3：用EcoRI处理的载体，不用碱性磷酸酶处理，不加cDNA片段，然后加连接酶做连接反应，并转化大肠杆菌感受态细胞，并在含有抗生素的平板上生长。 对照4：除了用碱性磷酸酶处理外，其他同对照3.
2014年分子考研真题
一.名词解释
complement DNA RNAsplicing
Gel filtration chromatography gene snRNP
OKAZIKIN sequence operon
enhancesome
一.简答题
1.从分子角度谈谈为什么DNA比RNA更广泛地用作遗传信息的携带者 2.试说明中介蛋白在转录调控中的作用原理 3.以下是DNA的电泳条带，说明DNA有哪三种拓扑异构构型？设计实验验证该结果。
4.翻译过程需要哪些组分？各自的功能分别是什么
三.论述题
1.CTD是RNA POL2的末端结构，说明其结构特点。它在转录各过程的作用是什么？
2.试从产生过程，作用机制和生物学功能几个方面比较miRNA和siRNA的异同点
3蛋白质A可以上调蛋白质B的表达水平，说明蛋白A可能在哪些水平发挥作用并设计实验证明。
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