食品安全检测技术实验报告

食品安全检测技术实验报告

姓名：学号：成绩：

2010-6-26

实验一、亚硫酸品红比色法测定白酒中的甲醇

姓名： 日期：

一、 实验目的

1、掌握甲醇测定的原理 2、掌握甲醇测定的方法 二、 实验原理

甲醇经氧化成加醛后，与品红亚硫酸作用生成紫色化合物，与标准系列定量。过量的高锰酸钾和硫酸反应，生成的二氧化锰和草酸以及硫酸反应生成硫酸锰。 三、 实验试剂及仪器 （一）试剂

1、高锰酸钾-磷酸溶液：称取3克高锰酸钾，加入15毫升磷酸与70毫升水混合，溶解后加水到10毫升。贮存在棕色瓶中。

2、草酸-硫酸溶液：称取5克无水草酸溶解与硫酸中至100毫升。 品红亚硫酸溶液：称取0.1克碱性品红，分次加入60毫升80度的水研磨，吸取上清液于100毫升容量瓶中，冷却后加入10毫升亚硫酸氢钠溶液和1毫升盐酸，过夜。

3、甲醇标准溶液：称取1.000克甲醇，置于100毫升容量瓶中，加水稀释

到刻度，再洗去10毫升甲醇溶液置于100毫升容量瓶中，加水稀释到刻度， 作为甲醇标准使用液。

4、无甲醇乙醇溶液：取0.3毫升，检验是否显色，如果显色则重新蒸馏。 （二）仪器

1、分光光度计（722S） 四、 实验方法

1、分别在0~5号比色管中加入1毫克/毫升的甲醇标准溶液0.1毫升、0.2毫

升、0.4毫升、0.6毫升、0.8毫升、1毫升（相当于0.1毫克、0.2毫克、0.4毫克、0.6毫克、0.8毫克、1毫克）。再分别于比色管中，加入0.5毫

升无甲醇乙醇。再在比色管中各加水至5毫升，再各加入5毫升品红-亚硫酸溶液，混匀，放置10分钟，再各加入2毫升草酸硫酸溶液，混匀，使之褪色，再加入5毫升品红亚硫酸溶液，20度以上静置30分钟，用2厘米比色皿，用零管调零点，于590纳米波长处测吸光度，得到标准曲线方程。

2、取1毫升白酒于于比色管中，再按照上述标准曲线制作时方法操作，测

定样品的吸光度。 3、试样结果计算

公式：

X=试样中甲醇的含量，单位为克每百毫升（克/100毫升）； m=测定试样中甲醇的质量，单位毫克； v=试样体积，单位为毫升 计算结果保留两位有效数字。

五、 实验结果与分析

1、不同浓度的甲醇吸光度测定结果如下表一所示

表一甲醇吸光度表

标准曲线：

甲醇标准曲线y = 0.2808x - 0.0291R2 = 0.981, 0.2430.8, 0.2130.6, 0.1420.4, 0.0610.2, 0.0370.1, 00.20.40.6毫克数/mg系列1线性 (系列1)X100mv1000管号 0号 1号 2号 3号 4号 5号 吸光度 0 0.037 0.061 0.142 0.213 0.243

0.30.250.20.150.10.050-0.050吸光度(A)0.811.2

标准曲线方程：y=0、2808x-0.0291 y----吸光度 x----甲醇毫克数 2、白酒中甲醇浓度： 所测吸光度A=0.16

根据y=0.2808x-0.0291 得x=0.67mg 所以， 100mXv1000=(100×0.6734)/(1×1000)=0.067克/100毫升

所以，所测试样中甲醇含量为0.067克/100毫升 3、讨论： （1）、甲醇的来源

a、如果用谷糠等为酿酒原料,在高温蒸发时,果胶质的甲基脂被分解,生成甲醇,蒸酒时被带入成品中。

b、工业酒精中常混有有害成分甲醇 ,一些不法之徒用工业酒精兑制假酒

（2）、影响甲醇测定因素 试剂因素

a、亚硫酸钠品红溶液

亚硫酸钠品红溶液宜与冷暗处保存不宜在室温下长期保存，失效的亚硫酸钠品红溶液由于亚硫酸的分解略显微红色，（可用此法初步判定是否失效），但是加入过量的亚硫酸钠会降低显色的灵敏度．故亚硫酸钠品红溶液的使用时间不宜过长.

b、甲醇显色反应的灵敏度与乙醇浓度相关，乙醇的浓度过高或过低均会导致显色的灵敏度下降，测定是要确保样品管与标准管的乙醇浓度一致

c、无甲醇乙醇的影响

在GB/T5009.48－2003中无甲醇乙醇溶液的制备中其验证方法是按照操作规程应不显色，该方法存在有很大弊病，若以目视法作显色判断，当甲醇浓度很低时肉眼是无法判定是否有色的；若以分光光度计进行比较，空白管中的无甲醇乙醇又从何而来！经试验验证无甲醇乙醇溶液的方法，只能在气相色谱法中验证。 环境因素：

在比色法测定白酒中甲醇含量的方法中，发色的温度和时间是决定最终检测结果关键，由于温度的过低或过高都会对结果带来相当大的影响

实验二、 白酒中糠醛的测定

姓名： 日期：

一、 实验目的

1、掌握糠醛测定的原理 2、掌握糠醛测定的方法 二、 实验原理

白酒中的糠醛在紫外波长为277纳米处有最大的吸收值，可由对比测定出酒中的糠醛含量。 三、 实验试剂及仪器

（一） 试剂

糠醛

（二） 仪器

紫外分光光度计

四、 实验方法

1、样品处理：将白酒稀释5倍

2、吸取0.1毫克/毫升的糠醛溶液分别在0~6号比色管中加入0.0毫升、0.1

毫升、0.3毫升、0.5毫升、0.7毫升、1毫升、1.2毫升于比色管中，加水至总体积10毫升，再各加入25毫升的50%乙醇至25毫升，以10毫升水和15毫升50%的乙醇溶液混合后调零，测定7个比色管中的溶液吸光度，得到标准曲线方程。

3、取样液10毫升于25毫升比色管中，用50%的乙醇溶液稀释到25毫升，

摇匀，按照上述方法测定样液吸光度。 4、计算公式

X1000ck100v 公式中C为糠醛含量，单位克/100毫升 v为样液体积，单位毫升；k为稀释倍数

五、 实验结果与分析

1、不同浓度梯度的糠醛溶液吸光度如下表2所示 表2 糠醛吸光度

标准曲线

白酒中糠醛标准曲线2.52y = 1.6683x + 0.0054R2 = 0.998系列1线性 (系列1)管号 0号 1号 2号 3号 4号 5号 6号 吸光度 -0.01 0.152 0.531 0.868 1.150 1.722 1.964

吸光度1.510.50-0.500.20.40.60.811.21.4糠醛毫升数

标准曲线方程：y=1.668x+.0054

y—吸光度 x—糠醛毫升数 2、白酒中的糠醛浓度为： 所测A=0.028

则，根据y=1.668x+0.0054 x=0.01355

1000ck所以，根据X 100v得，X=3.39

所以，样品中甲醛含量为3.39g

六、 讨论

1、糠醛的来源

糠醛又名吠喃甲醛，白酒中的糠醛主要来源于各种谷物及稻皮、谷糠等酿酒原料。它是白酒中酿酒辅料（填充料）中的多缩戊糖分解产生的。

2、影响糠醛测定因素 无糠醛乙醇及浓度的选择

酒中主要成分是水和乙醇，糠醛易溶于乙醇中，所以选用分析纯—尤水乙醇.稀释至10- 60%用紫外分光光度计测定，结果在此范围内不受影响.因此，选用与白酒乙醇浓度接近的50%（v/v）乙醇溶液及稀释样品使用。

实验三、白酒中杂醇油的测定

姓名： 日期：

一、 实验目的

1、 掌握杂醇油的测定的原理 2、 掌握杂醇油的测定的方法 二、 实验原理

杂醇油成分复杂，其中以正己醇、正戊醇、异戊醇、正丁醇、异丁醇、丙醇为代表。本法测定标准以异戊醇和异丁醇表示，异戊醇和异丁醇在硫酸作用下生成戊烯和丁烯，再与对二甲氨基苯甲醛作用生成橙黄色，与标准系列比较，求出样品中的杂醇油。 三、 实验试剂及仪器 （一）、试剂

1、0.5%对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液：称取0.5克对二甲氨基苯甲醛，加入硫酸溶液至100毫升。

2、无杂醇油乙醇：按照操作方式检测是否显色，如显色进行处理， 3、杂醇油标准溶液：取0.08克异戊醇和0.02克异丁醇，置于100毫升容量瓶中，加入无杂醇油乙醇50毫升，用水稀释到刻度。再从容量瓶中吸取5毫升每毫升到50毫升容量瓶中，定容到刻度，此溶液中每毫升含0.1毫克杂醇油， （二）仪器 分光光度计 四、 实验方法

1、 在0~4号比色管中分别加入每毫升含0.1毫克的杂醇油0.0毫升、0.1毫 升、0.2毫升、0.3毫升、0.4毫升、0.5毫升杂醇油标准溶液。再在各个比色管中加水到1毫升刻度，摇匀，放入冰浴中，沿壁加2毫升0.5%对二甲氨基苯甲醛硫酸溶液，摇匀，放到沸水中加热15分钟后，立即取出冰浴中冷却，加2毫升水，冷却混匀，10分钟后，以零号管调零，在520纳米下测定吸光度。

2、 吸取0.5毫升白酒置于比色管中，加水到1毫升混匀后按照上述方法， 加试剂，测定吸光度。

3、 计算公式

XA100V A ：样品中测定的杂醇油的含量，单位克/100毫升； V ：样品的体积数，单位毫升。 五、 实验结果与分析

1、 不同浓度梯度的杂醇油溶液吸光度如下表3所示

表3 不同浓度杂醇油吸光度

标准曲线：

白酒中杂醇油标准曲线0.160.140.120.10.080.060.040.0200y = 0.2749x + 0.0046R2 = 0.991管号 0号 1号 2号 3号 4号 吸光度 0.037 0.065 0.083 0.110 0.145

0.5, 0.1450.4, 0.11吸光度0.3, 0.0830.2, 0.0650.1, 0.0370, 00.10.20.3毫升数0.40.50.6系列1线性 (系列1)

方程为：y=.0.2749x+0.0046 x-糠醛毫克数 y--吸光度

2、白酒中的杂醇油含量：

所测A=0.070

根据y=.0.2749x+0.0046，得x=0.2379

A所以，根据 X100V得，x=0.48

所以，试样中杂醇油含量为0.48 六、 讨论

1、 杂醇油的来源

杂醇油系指甲醇、乙醇外的高级醇类。它包括正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正戊醇、仲戊醇、己醇、庚醇等。其来源主要为蛋白质氨基酸与糖

类经酵母细胞“氮代谢”中分解而成。 2、 影响杂醇油测定因素

（1）用对二甲胺基苯甲醛显色比色法测定酒中杂醇油含量时，不同种类对显色剂的显色程度很不一致。对相同量醇类，其显色灵敏度为异丁醇>异戊醇>正戊醇，而正丙醇，异丙醇，正丁醇等呈色灵敏度极差。同时酒中杂醇油成分极为复杂，其比例更为不一，因此用某一醇类作为标准来计算杂醇油含量时误差较大。为减小测定误差，标准杂醇油应尽量与酒中杂醉油成分相似。据醇类的显色灵敏度和酒中杂醉油成分分析，采用异丁 醇与异戊醉作为标准杂醇油混合液，其结果较为接近。，

（2）对二甲胺基苯甲醛与杂醇油所呈颜色是随时间延长而变浅，但变化缓慢，故采用显色后立即进行比色。当加人显色剂后应摇匀。若不经摇匀就置人沸水浴中显色，其结果偏低很大。对二甲胺基苯甲醛硫酸溶液需新鲜配 制。存放2天后结果就会偏低。

（3）乙醛含量在0.1%以下基本上无影响。过高时可用盐酸间苯二胺除 去。

（4）酒样管制备时，若采用lml酒样，加gml水，这样测定结果会偏高，因这样稀释法总体积往往不足10ml。.