布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验的比较

南富牲兽庭鑫　２０１　３年（第３４卷）第２期　布鲁氏菌病虎红平板凝集试验　和试管凝集试验酌比较　王英华，吴志明，方先珍，程果。方剑玉，李茂龙　（河南省动物疫病预防控制中心，河南郑州，４５０００８）　中图分类号：￥８５２．６１　４文献标识码：Ｂ　文章编号：１００４－－５０９０２０１３０２－－００４７－－０１　布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患传　Ｔ１８６４６—２００２布鲁氏菌病诊断技术中试管凝集试验的操　染性疾病，包括人间布鲁氏菌病和动物间布鲁氏菌病。人　作步骤进行。首先稀释血清，稀释度依次为１：１２．５、１：２５、　间布鲁氏菌病一般由动物间传播而来，一旦发生该病，将　１：５０。加入等量稀释后的抗原，混匀，则血清稀释度依次　会引起严重的公共卫生问题。当前全国的布鲁氏菌病疫　为１：２５、１：５０、１：１００。同时做阴性对照、阳性对照及抗原对　情正处于历史高发时期，根除布鲁氏菌病传播的根本措　照，并配制比浊管。将全部试管、对照管及比浊管充分震　施是扑杀患病动物，消灭传染源。因此快速检出阳性患　荡后置３７℃温箱中２０—２２ｈ，取出后放室温２　ｈ，然后判定　畜并扑杀之是有力措施。目前国内普遍采用的检测方法　结果。判定标准根据反应的有无及其强度进行判定，以各　主要有：ＲＢＰＴ初次筛选，然后利用ＳＡＴ进行最终定性。　管中上层液体的清亮度记录凝集反应的强度（凝集价）。　ＲＢＰＴ试验成本低，步骤简单，易于操作，反应时间短，结　如果其凝集价在１：５０达５０％以上凝集时（参照比浊管的清　果出现迅速，通常４ｍｉｎ出现检测结果，利于疫情处置。　亮度），则判定为阳性。　ＳＡＴ实验步骤繁琐，过程耗时长，２４ｈ以上出检测结果，能　准确定性。因此，本实验旨在利用ＳＡＴ定性的准确性评价　２结果　ＲＢＰＴ实验结果的参考价值，以备处置羊布鲁氏菌病疫情　通过利用ＲＢＰＴ对１４６０份羊血清进行检测，结果检出　时参考。　２５０份羊血清阳性样品，其中一个“＋”阳性样品为１６份，两　１材料与方法　个“＋＋”以上样品为２３４份；ＳＡＴ复检结果为２４２份血清样　品为阳性，其中２３４份ＲＢＰＴ两个“＋＋”以上的样品ＳＡＴ结　１．１材料　果全部为阳性，１６份ＲＢＰＴ＋的样品ＳＡＴ结果８份为阳性，８　采自豫西和豫北５个羊场（其中一个场为发病场），共　份为阴性，ＲＢＰＴ＋＋以上的样品与ＳＡＴ阳性符合率为　１４６０份血清样品。　１００％，ＲＢＰＴ一个“＋”阳性样品与ＳＡＴ阳性符合率为５０％，　１．２诊断试剂　二者总阳性符合率为９６．８％。　布鲁氏菌病阳性和阴性血清购于中国预防医学科学　院流行病学微生物学研究所，布鲁菌病虎红平板凝集抗原　３讨论　和试管凝集抗原购于中国ＣＤＣ传染病所。　布鲁氏菌病是一种人兽共患传染病，发病呈扩大蔓延　１．３试验方法　之势。目前常把血清抗体检测做为其诊断方法。从实验　１．３．１血样采集及血清制备将羊保定采用颈静脉采血，　结果发现，ＲＢＰＴ检测了１４６０份样品，检出２５０份阳性；　用记号笔在一次性采血器塑料管壁上注明对应的耳标号，　ＳＡＴ复检后，检出２４２份阳性，８份阴性，阳性样品符合率　除去针头护套和芯杆，竖直整齐地放于采血容器中送实验　９６．８％。与ＳＡＴ相比，ＲＢＰＴ的敏感性为１００％，特异性为　室离取血清。　９６．８％。说明ＲＢＰＴ可能会检出假阳性，但假阳性出现几　１．３．２虎红平板凝集试验（ＲＢ　）　该试验按ＧＢ／　率并不大。　Ｔ１８６４６—２００２布鲁氏菌病诊断技术中虎红平板凝集试验　ＲＢＰＴ操作简单，易于掌握，１份样品４ｍｉｎ出现检测结　的操作步骤进行，在灭菌洁净的玻璃板上，用移液枪分别　果，ＳＡＴ试验步骤繁琐，试验过程耗时长，等待结果需要２４　吸取被检血清３０７１与虎红平板凝集抗原３０７１混合均匀，同　小时以上。通常情况下，ＲＢｔｒｌ＂虽只用于布鲁氏菌病的大　时设阴、阳性对照。结果判定：在阴、阳性血清对照成立的　范围初筛实验，阳性样品的确诊需要等待试管凝集试验等　条件下，对被检血清进行判定。受检血清在室温（２０℃）　的结果。本试验结果表明ＲＢＰＴ虽然会出现假阳性的结　４ｍｉｎ内出现肉眼可见凝集现象，判为阳性（＋），无凝集现　果，但出现几率不大。当突发布鲁氏菌病疫情时，为了节　象，呈均匀粉红色者判为阴性（一）。　省时间，节省人力、物力和财力，尽快、尽早控制疫情的蔓　１．３．３　试管凝集试验（ＳＡＴ）　该实验依据ＧＢ／　延，可以参考ＲＢＰＴ的结果处置疫情。口　稿件倍箱ｈｎｘｍｓｙｓｃｂ＠１　６３．ｃｏｍ　河南诸美种猪育种集团：专注育种，用，６Ｒａ务，造福社会